药品生物检定技术 药品生物检定的基本概念 任务一：光谱分析技术.ppt

比值T/T0 光源 单色器 吸收池 检测器 显示系统 光束分裂器 单波长双光束分光光度计 常用分子吸收光谱分析仪---紫外-可见分光光度计  * 分子吸收法: 紫外可见分光光度计、红外摄谱仪 分子光谱 分子发射法: 荧光分光光度计 光谱技术 原子吸收法：原子吸收分光光度计 原子光谱 原子发射法：原子发射光谱仪（火焰光度计、ICP） * I0：入射光强度 C:溶液浓度 b:液层厚度 I:透射光强度 T:透光度 A:吸光度 k:吸光系数 b I0 I 朗伯-比尔(Lambert—Beer) 定律 * b I0 I 朗伯-比尔定律 吸光系数单位 k:吸光系数 摩尔吸光系数(ε) L·mol－１·cm－１ dL·g－１·cm－１ * 1. 单色光（入射光是单色光；） 3. 稀溶液吸收过程中，吸收物质互相不发生作用 浓度增大，分子之间作用增强. 2. 吸光质点形式不变吸收发生在均匀的介质中； 光谱分析技术---定量分析原理 朗伯-比尔定律的适用条件 * 浓度计算方法 1、标准比较法 CU=AU*CS/AS 2、标准曲线法 Y=Ax+b b I0 I 0 1.0 2.0 3.0 4.0 c(mg/mL) A 。 。 。 。 * 0.80 0.60 0.40 0.20 0.00 Ax cx 光谱分析技术---定量分析原理 朗伯-比尔定律的应用 * 发射（散射）光强度不遵从朗伯-比尔定律 I0 0 1.0 2.0 3.0 4.0 c(mg/mL) I 。 。 。 。 * 0.80 0.60 0.40 0.20 0.00 I x cx 光谱分析技术---定量分析原理 发射光谱分析与散射比浊定量计算 发射（散射）光强度在一定条件下与物质浓度成正比 I * 药品生物检验常用光谱分析仪器 * 光谱分析仪类型及常用光谱分析仪 分子吸收光谱仪:紫外可见分光光度计 分子光谱仪 分子发射光谱仪:荧光分光光度计 光谱分析仪 原子吸收光谱仪：原子吸收分光光度计 原子光谱仪 原子发射光谱仪：火焰光度计 医学检验常用光谱分析仪---分类 * （1）、光 源 （2）、单色器（或滤光片） （3）、样品单元 （4）、检测器 光谱分析仪器光学系统的重要组成结构 * 氙灯 氢灯 钨灯 吸收光谱仪、用光做激发能量的发射光谱仪 必须有光源的光谱分析仪 * 钨灯、卤钨灯 ----连续光谱 320—2500nm 氢灯和氘灯 ----连续光谱 185—375nm氙灯 ----紫外可见区连续光谱汞灯 ---- 254—734nm离散线光谱 空心阴极灯 ----单波长线光谱  紫外可见分光光度计 常用光源的适用光谱范围及适用的仪器 荧光分光光度计 原子吸收分光光度计 光谱分析仪器的光学系统---光 源 * 原理及类型 1）吸收滤光片 2）干涉滤光片 3）复合滤光片 带通滤光片 截止滤光片 光谱分析仪器的光学系统---滤光片 * 带通滤光片 属于吸收滤光片 透光曲线 有效带宽（半峰宽度） 带通滤光片吸收曲线上透光度等于最大透光度一半的波长范围 530-430=100nm 光谱分析仪器的光学系统---滤光片 * 单色器（Monochromator）：能将来自光源的复合光分选出所需波长的的单色光光束