园艺植物组织培养 外植体采集与处理 无菌操作-外植体选择和处理.ppt

项目二 无菌操作 园艺技术专业教学资源库 模块三 组培基本操作技术 1 2 3 CONTENTS 接种用品准备 外植体选择和处理 无菌操作 项目二 无菌操作 二、外植体选择和处理 园艺植物组织培养 (1)根据培养目的选择 (2) 具有代表性 （一）外植体的选择 原则： 二、外植体选择和处理 园艺植物组织培养 幼嫩茎尖 营养芽 二、外植体选择和处理 园艺植物组织培养 ◆选择优良的种质（即基因型） ＞ ＞ 二、外植体选择和处理 园艺植物组织培养 ◆选择生理状态良好的材料 二、外植体选择和处理 园艺植物组织培养 ◆在生长开始的季节选取 二、外植体选择和处理 园艺植物组织培养 ◆材料生长健壮、无病虫害 二、外植体选择和处理 园艺植物组织培养 ◆确定合适的取材部位 ◆考虑： ◆最好做对比试验 来源 培养难易 培养途径与变异性 二、外植体选择和处理 园艺植物组织培养 ◆选择合适的外植体大小 培养目的 外植体大小 胚胎培养或脱毒 快速繁殖 宜小 宜大 外植体 大小(一般0.5-1.0cm) 叶片、花瓣等 茎段 茎尖分生组织 5 mm×5 mm 1-2个茎节 0.2-0.5 mm 带1-2叶原基 二、外植体选择和处理 园艺植物组织培养 （二）接种材料预处理 (1)接种材料预培养 (2)就地套袋 (3)接种材料修整与冲洗 (4)消毒 二、外植体选择和处理 园艺植物组织培养 接种材料修整与冲洗 二、外植体选择和处理 园艺植物组织培养 消毒 70%酒精浸泡10-30s 0.1-1%升汞5-8 min。 用化学灭菌剂浸润灭菌，消毒剂处理（可加吐温活性剂） 无菌水冲洗3-10次 接种 消毒原则：杀死材料表面的全部微生物，又不损伤或只轻微损伤植物材料。 消毒液要 浸没材料 流水冲洗或洗衣粉漂洗 二、外植体选择和处理 园艺植物组织培养 灭菌剂 使用浓度 消毒时间/min 去除的难易 效果 酒精 过氧化氢 漂白粉 次氯酸钙 70%~75% 10%~12% 饱和溶液 9%~10% 0.5~2 5~10 5~30 5~30 易 最易 易 易 好 好 很好 很好 次氯酸钠 0.7%~2% 5~30 易 很好 氯化汞 0.1%~0.5% 3~10 较难 最好 抗菌素 4~50mg/L 30~60 中 较好 常用灭菌剂的使用浓度与效果比较 二、外植体选择和处理 园艺植物组织培养 接种材料表面消毒 二、外植体选择和处理 园艺植物组织培养 复习思考题 1.如何选择合适的外植体？ 2.外植体预处理方法有哪些？