Del1在人牙周膜成纤维细胞中的表达及相关炎症机制初探.PDF

第38卷第7期 南京医科大学学报（自然科学版） 2018年7月 ACTAUNIVERSITATISMEDICINALISNANJING（NaturalScience） ·915 · Del⁃1在人牙周膜成纤维细胞中的表达及相关炎症机制初探 * * 王玉珍，陈 旭，吴偲偲，葛 舒，徐 艳 ，叶 宇 南京医科大学口腔疾病研究江苏省重点实验室，南京医科大学附属口腔医院牙周科，江苏 南京 210029 ［摘 要］ 目的：检测Del⁃1蛋白在人牙周膜成纤维细胞中的表达情况，并观察内毒素（lipopolysaccharides，LPS）对人牙周膜成 纤维细胞Del⁃1表达的影响，探讨其在牙周炎进展中的可能作用机制。方法：组织块法取人牙周膜成纤维细胞，用细胞免疫荧 光、流式细胞术及体外管腔形成试验鉴别细胞来源，细胞免疫荧光检测Del⁃1蛋白在人牙周膜成纤维细胞中的表达情况；用不 同浓度LPS刺激细胞，检测Del⁃1蛋白的表达水平，以Del⁃1减少最显著的LPS浓度为最佳刺激浓度，再用该浓度的LPS刺激细 胞不同时间，检测Del⁃1及炎症因子IL⁃6的表达水平；用不同浓度的Del⁃1蛋白预刺激细胞1h，再用最佳浓度的LPS刺激细胞 24h，检测炎症因子IL⁃6的表达情况；用最适宜浓度的Del⁃1蛋白预刺激细胞1h，再用LPS刺激细胞10min，检测IκBα的激活情 况。结果：Del⁃1蛋白在人牙周膜成纤维细胞中有表达，定位于细胞的胞浆中；LPS刺激细胞时Del⁃1的表达水平降低，并随浓 度的升高和处理时间的延长而下降，IL⁃6的表达与之相反；Del⁃1蛋白可下调LPS诱导的炎症因子IL⁃6的表达，抑制IκBα的磷 酸化。结论：本研究首次发现Del⁃1可以在人牙周膜成纤维细胞中表达，且在LPS刺激人牙周膜成纤维细胞时表达量降低，Del ⁃1蛋白可通过抑制NF⁃κB通路的激活，在牙周炎的发生发展中发挥拮抗作用。 ［关键词］ 牙周膜成纤维细胞；Del⁃1/Edil3；炎症；内毒素 ［中图分类号］ R781.4 ［文献标志码］ A ［文章编号］ 1007⁃4368（2018）07⁃915⁃07 doi：10.7655/NYDXBN ExpressionofDel⁃1 inhumanperiodontalligamentcellsanditsrelatedinflammatory mechanism * * WangYuzhen，ChenXu，WuSisi，GeShu，XuYan ，YeYu JiangsuKeyLaboratoryofOralDiseases，NMU，DepartmentofPeriodontology，theAffiliatedStomatologicalHospital ofNMU，Nanjing210029，China ［Abstract］ Objective：ToinvestigatewhetherDel⁃1isexpressedinhumanperiodontalligamentcells（hPDLCs），andtheeffectof lipopolysaccharides（LPS）ontheexpressionofDel⁃1inhPDLCs，andtoexplorethepotentialmechanismofDel⁃1inthedevelopmentof periodontitis. Methods：HPDLCswereisolatedandculturedbytissueblockmethod，andimmunofluorescenceassay，flowcytometry andMatrigelassaywereusedtoidentifycells.ImmunofluorescencewasusedtodetectifDel⁃1wasexpressedinhPDLCs. Then variableconcentrationsofLPSwereusedtostimulatehPDLCs，andtheexpressionofDel⁃1wasdetected.Theoptimalconcentrationof L