临床输血检验技术 标准化理论课件、新生儿溶血病的实验室检查 新生儿溶血病及母亲血清中Ig抗体效价测定.ppt

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职业教育医学检验技术专业教学资源库 新生儿溶血病及母亲血清中Ig抗体效价测定 学习要求 掌握新生儿溶血病实验室检查中血型血清学检测原理、方法及质量控制 了解常规检查项目及检测结果判断 新生儿溶血病——定义 广义 狭义 各种病因使胎儿或新生儿红细胞破坏增多的疾病,病因除母婴血型不合之外、还有红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺陷、遗传性球形红细胞增多症、地中海贫血等。 特指母婴血型不合,母亲体内产生与胎儿血型抗原不合的血型抗体,这种抗体通过胎盘进入胎儿体内,引起胎儿或新生儿同种免疫性溶血性疾病,常见由ABO和Rh血型系统的血型不合。 新生儿溶血病---发病原因 由于胎儿遗传了父亲有而母亲没有的基因,从而刺激母体产生相应的免疫性抗体,该抗体通过胎盘进入胎儿体内,并与胎儿红细胞上相对应抗原结合,导致胎儿红细胞破坏。 新生儿溶血病----发病机制 产道损伤 胎儿红细胞进入母体 产生IgG进入胎盘 抗原抗体结合 细胞溶血 新生儿溶血病----临床表现 贫血 髓外造血 肝脾肿大 Hb降低 全身水肿 胆红素增多 黄疸、胆红素脑病 血常规检查 红细胞、血红蛋白可正常或下降 网织红细胞常增多 白细胞可增高 血小板计数可正常 血涂片可见有核红细胞和球形红细胞 血液胆红素测定 胎儿红细胞破坏增多,血红蛋白释放增加,血液中胆红素增高,以未结合胆红素升高为主,若溶血病患儿出生后黄疸逐渐加深,胆红素应动态检测。 羊水胆红素含量测定 正常羊水无色透明,严重溶血时羊水呈黄色,测定羊水胆红素含量有助于胎儿病情及考虑母体终止妊娠时间。 血型鉴定 鉴定夫妻双方的ABO血型系统和Rh血型系统,以确定夫妻血型是否配合 血型鉴定 妻子血型 丈夫配合血型 丈夫不配合血型 O O A、 B、 AB A O、 A B、 AB B O、 B A、AB AB O、 A、 B、 AB / RhD阳性 RhD阳性、RhD阴性 / RhD阴性 RhD阴性 RhD+ 母亲血清Ig抗体效价测定 当母亲血清中IgG抗A/抗B效价≧1:64时,提示血型不合,胎儿有可能发生溶血。所以检测母亲血清中有无IgG性质的抗体并测定其效价,即可预计ABO-HDN发生的可能性。检测主要有抗人球蛋白试管法和微柱凝胶卡式法。 母亲血清Ig抗体效价测定 原理 血清以2-巯基乙醇或二硫苏糖醇处理后,IgM抗体分子裂解为6~7s亚单位。此种亚单位虽然仍有与抗原结合能力,但已失去与其相应红细胞凝集作用。IgG抗体分子则不被2-Me或DDT灭活,保持与相应红细胞致敏的血清学特性,所以通过2-Me或DDT处理血清后,可达到检测血清中IgG抗体的目的. 2-Me或DDT 200μl母体血清 200μl DTT (或2-Me) 应用液 37℃水浴30-60分钟 400μl 处理血清 各200μl 生理盐水 母亲血清Ig抗体效价测定 卡式法 处理血清 标记并稀释 母亲血清Ig抗体效价测定 200μl 200μl 200μl 200μl 200μl 200μl 200μl 200μl 200μl 2 4 8 64 16 32 128 256 512 1024 50μl 50μl 50μl 50μl 50μl 50μl 16 32 64 128 256 512 倍比稀释 加样 母亲血清Ig抗体效价测定 0.5-0.8% 红细胞悬液 50μl 50μl 50μl 50μl 50μl 50μl 加相应的红细胞悬液 孵育离心,观察结果 母亲血清Ig抗体效价测定 以出现1+阳性反应的最高稀释度的倒数为IgG抗-A或抗-B效价。 质量控制 母亲血清Ig抗体效价测定 简述新生儿溶血的发病原因和发病机制? 想一想 想一想 IgG抗A、抗B效价测定结果与Rh不规则血型不规则抗体效价测定结果对于临床意义有何区别? * * 职业教育医学检验技术专业教学资源库 * *

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