临床免疫检验技术 第四单元 补体系统 第四章 补体系统.ppt

补体激活途径 经典（传统） 途径 替代（旁路） 途径 激活C5 细胞裂解 抗体依赖 甘露糖凝集素 途径 非抗体依赖 激活C3形成C5转化酶 （一）补体的自身调控 （二）调节因子的作用 四、补体活化的调节 第三节 补体的生物学功能 补体系统的功能可分为两大方面： 补体在细胞表面激活并形成MAC，介导溶细胞效应； 补体激活过程中产生的蛋白水解片段，介导各种生物学效应。 1 .溶菌、溶细胞作用 2 .调理和免疫粘附作用 3 .清除免疫复合物 4 .介导炎症反应 5 .参与免疫调节 补体的生物学功能 MAC的电镜结果 补体诱导的RBC膜的破裂 II型超敏反应 1.溶菌、溶细胞作用 2.调理和免疫粘附作用 3.清除免疫复合物 Ag-Ab复合物（可溶性）? C3b或C4b?与血细胞（如红细胞、血小板）CR结合?吞噬清除。 4.炎症介质作用 (1)过敏毒素作用(C5a、C3a和C4a) C5a、C3a?肥大细胞和嗜碱性 粒细胞（C5aR、C3aR)?释放活 性介质(如组胺、白三烯及前列 腺素等)?过敏反应性病理变化。 (2)趋化作用 趋化因子C5a、C3a、 C4a和C5b67 ?吞噬细胞向感染部位聚集?炎症反应。 (3)激肽样作用 C2a、C4a能增强血管的通透性? 炎性渗出、水肿。 5.免疫调节作用 (1）C3b捕捉、固定抗原，促吞噬细胞等抗原提呈细胞处理和提呈 （2）C3b与B细胞表面CR1结合促B细胞增殖分化 （3）增强杀伤细胞的ADCC效应 先天性缺陷： C1、C2、C4缺损发生系统性红斑狼疮 C1INH缺陷遗传性血管神经性水肿 I因子缺陷导致严重的反复细菌感染 高补体血症：炎症、肿瘤 低补体血症： 补体消耗过多：血清病、肾小球肾炎、SLE 补体大量丧失：肾病综合症、大面积烧伤 补体合成不足：肝硬化、肝脏疾病 第四节 补体系统异常与疾病 系统性红斑狼疮（SLE） 遗传性血管神经性水肿 第五节 补体检测技术与临床应用 补体的检测包括：总补体活性的测定 单个补体成分的检测 检测补体的方法有两种，即免疫化学法和免疫溶血法。免疫化学法是以针对受检补体成分的特异性抗体作为试剂，直接检测补体的方法。本节免疫溶血法。 ??? 一、总补体溶血活性的测定（CH50） 基本原理：利用绵羊红细胞(SRBC)与特异性抗体（溶血素）结合后可激活补体，导致红细胞溶血。溶血程度与补体的活性相关，当红细胞和溶血素量一定时，在规定的反应时间内，溶血程度与补体量及活性呈一特殊的S形曲线（如图）。以溶血百分率为纵坐标，相应血清量为横坐标，可见在30%～70%溶血时几乎呈直线，故实验常以50%溶血作为判定终点。以引起50%溶血所需最少补体量为一个CH50，可计算出待测血清中总补体溶血活性，以CH50U/ml表示。 试管法 在试管中将受检标本作一系列稀释后，分别加入溶血素和羊红细胞，经一定时间的温育，使反应完全。标本中如含有补体，反应后使红细胞溶血。以50%溶血作为终点，又称为50%溶血试验(CH50)。引起50%溶血所需最小补体量为一个CH50。 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 1 2 3 4 ml 溶 血 % 溶血程度与补体含量的关系 豚鼠血清(1/500) 1.标本的采集和保存 在补体测定中标本一定要用新鲜的，若要保存应置于-70℃以下的低温中存放。 2.检测方法 取与50%溶血相接近二管在分光光度计分别读取光密度值，以最接近50%溶血标准管的一管，按下公式求得50%溶血的总补体值。 １ 每ml血清总补体活性＝ ×稀释倍数 血清用量 3.影响测定的因素 补体的溶血活性除与反应体积有关外，还与反应时缓冲液的pH值、离子强度、钙镁离子浓度、羊红细胞量和反应温度均有一定关系。 二、单个补体组分的检测 测定方法可根据各补体成分的生物学特性设计，常用免疫溶血法和基于抗原抗体反应的免疫化学法，前者用来检测单个成分的活性，后者可测定其含量。 （一）溶血试验检测C4活性 采用一些先天性缺少补体个别成分的动物或人血清，或用一些化学试剂专一地灭活正常血清中补体某个组分，然后加入致敏羊红细胞。由于该血清中