农残实习报告.doc

　　 　　农残实习报告【一】:农药残留分析检测校内实习报告 64号 林亮 　　福建农林植物保护学院 　　农药残留检测分析校内实训报告 　　姓名林亮 　　学号102251002064 　　成绩 　　指导老师廖金英 　　实习地点福建农林大学制药工程专业实验室 　　（下安实验楼3号楼6楼） 　　实训时间20129 　　1目的与意义 　　（1）掌握用标准曲线法测定待测液的浓度。 　　（2）了解高效液相色谱仪操作时的一些注意事项 　　(3)了解对农药残留进行检测与分析的目的掌握用标准曲线法测定待测液的浓度。 　　（4）熟悉并掌握高效液相色谱仪检测的操作流程。 　　（5）熟悉并掌握高效液相色谱仪的主要结构组成 　　2实训内容 　　1 样品预处理 　　1试样制备 　　试样为含未知浓度的毒死蜱水样。 　　2提取 　　量取5mL水样加入分液漏斗中，并加入20mL乙酸乙酯置分液漏斗，充分震荡，静置分层，收集上层乙酸乙酯相，下层水相再用10mL、10mL乙酸乙酯同上法萃取两次，收集上层乙酸乙酯，加入2-5g无水硫酸钠脱水，加入少量活性炭脱色。重复三次。 　　3净化 　　收集提取液，在60-70℃水浴旋转蒸发器中，浓缩至2-3mL，并且用乙酸乙酯定容。 　　2添加回收实验农残实习报告。 　　操作步骤 　　在20mL水中，分别加入2μL、20μL和200μL的 10000mg/L的毒死蜱溶液，吸2mL于分液漏斗中，先用10mL乙酸乙酯萃取，充分震荡，静置分层，收集上层乙酸乙酯相，下层水相再用5mL、5mL乙酸乙酯同上法萃取两次，收集上层乙酸乙酯，加入2-5g无水硫酸钠脱水。而后进行浓缩，操作方法与样品处理相同。 　　3高效液相色谱检测 　　1高效液相色谱仪工作原理 　　高效液相色谱仪（HPLC）包括溶剂传输系统 (泵)、进样器、色谱柱、检测器和流动相五个部分。HPLC分离是利用试样中各组分在色谱柱中的淋洗液和固定相间的分配系数不同，当试样随着流动相进入色谱柱中后，组分就在其中的两相间进行反复多次的分配（吸附－脱附－放出）由于固定相对各种组分的吸附能 　　力不同（即保存作用不同），因此各组份在色谱柱中的运行速度就不同，经过一定的柱长后，便彼此分离，顺序离开色谱柱进入检测器，产生的离子流信号经放大后，在记录器上描绘出各组分的色谱峰。 　　2高效液相色谱仪操作流程 　　（1）过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜。 　　（2）对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。 　　（3）打开HPLC工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。 　　（4）进入HPLC控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。 　　（5）有一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵，直接在泵的出水口，用针头抽取。冲洗进样阀，需要在manual菜单下，先点击purge，再点击start，冲洗时速度不要超过10ml/min。 　　（6）调节流量，初次使用新的流动相，可以先试一下压力，流速越大，压力越大，一般不要超过2000。点击injure，选用合适的流速，点击on，走基线，观察基线的情况。 　　（7）设计走样方法。点击file，选取selectusersandmethods，可以选取现有的各种走样方法。若需建立一个新的方法，点击newmethod。选取需要的配件，包括进样阀，泵，检测器等，根据需要而不同。选完后，点击protocol。一个完整的走样方法需要包括①进样前的稳流，一般2-5分钟；②基线归零；③进样阀的loading-inject转换；④走样时间，随不同的样品而不同。 　　（8）进样和进样后操作。选定走样方法，点击start。进样，所有的样品均需过滤。方法走完后，点击postrun，可记录数据和做标记等。全部样品走完后，再用上面的方法走一段基线，洗掉剩余物。 　　（9）关机时，先关计算机，再关液相色谱。 　　3高效液相色谱仪使用注意事项 　　（1）操作泵时，必须对溶剂进行脱气。 　　（2）使用缓冲溶液之后一定要用水清洗。 　　（3）启动泵之前要灌泵，检查泵压。 　　（4）使用进样针前要清洗干净，并去除气泡。 　　（5）清洗进样针时应选择样品易于溶解的溶剂。 　　（6）使用自动进样器针管清洗溶液时要格外注意。 　　（7）保证样品溶液与流动相之间的可混合性。 　　（8）作为新色谱柱，最好在使用前，低于分析流速下（0.2-0.3ml/min）过大约30分钟。 　　（9）关机时，最好逐步降低流速，不要突然降低压力，这样对色谱柱以及系统都会有影响。 　　（10）当使用缓冲溶液时，切记要先用水冲洗系统，再改用有机溶剂，这样可以避免结晶现象出现，堵塞柱子。 　　（11）使用前，最好过滤流动相及样品，避免颗粒物产生堵塞。 　　（12）样品最好溶解