虎杖中蒽醌类成分的提取分离鉴定1.ppt

实验二 虎杖中蒽醌类成分提取分离及鉴定 一、目的要求 l、了解苷和苷元的提取分离方法 2、掌握梯度pH萃取法在分离中草药有效成分中的应用。 3、掌握蒽醌类化合物的鉴定方法 二、实验原理 利用苷和苷元都溶于乙醇的性质，用乙醇提取总成分。根据苷和苷元溶解性能不同，以乙醚分出极性小的苷元游离蒽醌，以水分离出极性大的苷类成分，进一步用PH梯度萃取法使酸性强弱不同的蒽醌得以分离。 旋转蒸发器主要通过两个手段加速液体蒸发，一是抽真空，降低液体沸点。二是旋转物料瓶，使瓶内壁产生很薄的液膜，加速蒸发（液膜比液体本体要容易蒸发）。 回流提取法：应用有机溶剂加热提取时，需采用回流加热装置，以免溶剂挥发损失。一般小量操作时，可将药材粗粉装入大小适宜的烧瓶中(药材的量为烧瓶容量的1/3～1/2)，加溶剂使其浸过药面1cm～2cm高，烧瓶上接一冷凝器，实验室多采用水浴加热，沸腾后溶剂蒸汽经冷凝器冷凝又流回烧瓶中。如此回半小时，滤出提取液，加入新溶剂重新回流半小时，合并提取液，蒸馏回收溶剂得浓缩提取物。大量生产亦可采用类似的装置。此法提取效率较冷渗法高，但受热易破坏的成分不宜用此法，且溶剂消耗量大，操作麻烦。由于操作的局限性，大量生产中较少被采用。 三、实验内容 (一)虎杖中蒽醌苷元的提取与分离 1、虎杖中蒽醌类成分的提取： 2、蒽醌苷与苷元的分离： 3、不同酸性蒽醌苷元的分离（梯度pH萃取法） 流程图 加5%NaHCO3溶液10ml萃取至水层无色 大黄酸 大黄素 含羧基或2个β羟基 1%氢氧化钠10ml萃取至水层无色 含1个β羟基 含2个a羟基 盐酸酸化 盐酸酸化 乙醚和水的混合物 大黄酸 大黄素 大黄酚 大黄素甲醚 （二）鉴定 1、颜色反应 (l)、取以上a,b,c少量，分别置于三支试管中，加少量乙醇溶解后，加2％NaOH溶液数滴，观察颜色变化。 （2）、取以上a,b,c少量，分别置于三支试管中，加少量乙醇溶解后，再滴加1%醋酸镁的乙醇溶液数滴，观察颜色变化。 （3）、取以上a,b,c少量，分别置于三支试管中，加少量乙醇溶解后，再滴加1%三氯化铁的乙醇溶液数滴，观察颜色变化。 2、薄层色谱(TLC)： 吸附剂：硅胶G－CMCNa板，用前活化 展开剂：石油醚—乙酸乙酯 (2：1) 样 品：a,b,c乙醇液，大黄素标准品 显 色：①先置可见光下观察色斑， 后紫外灯下观察荧光斑点 ②再用2%NaOH喷洒显色 结果及计算比移值 四、 实验讨论及注意事项 1.常压蒸馏回收溶剂之前，应该加入沸石，以免暴沸。 2.什么是梯度pH萃取法，适用于哪些物质的分离？试解释本次试验中pH萃取法应该注意哪些事项？ 3.两相萃取时，不可猛力振摇，只能轻轻旋转摇动，以免造成严重乳化现象而影响分层。如果出现乳化现象，如何破除？ 4.TLC鉴定a,b,c时，解释三者相对比移值的大小关系？