SRPK1促进GSK3β自磷酸化抑制β-catenin降解介导NSCLC Gefitinib耐药的机制研究.pdf

SRPK1 促进GSK3β 自磷酸化抑制β-catenin 降解介导NSCLC Gefitinib 耐药的机制研究 摘 要 80% 的肺癌类型是非小细胞肺癌（NSCLC ），其致死率位于所有癌症中的首位。 NSCLC 患者就诊时常见于癌症晚期，放、化疗效果欠佳。转移性NSCLC 的中位生存期 只有8-10 个月。目前，以酪氨酸激酶抑制剂（TKI ）为代表的分子靶向治疗已成为NSCLC 患者的主要治疗手段，可以有效延长对肿瘤特定基因突变患者的生存期。Gefitinib 是酪 氨酸激酶抑制剂（TKI ）的一代药物，用于治疗携带EGFR 激活型突变的NSCLC 患者。 治疗初期，大多数携带EGFR 突变的NSCLC 患者对TKI 敏感，但治疗8-9 个月后大约 80%-90%的患者会产生TKI 耐药性。目前，对于Gefitinib 耐药的NSCLC 患者，尚无明 确的机制和有效的治疗方法。丝氨酸-精氨酸蛋白 （SR ）激酶 1 （SRPK1）是 SRSF1/2 的激酶，包含 PKC 超家族激酶结构域。我们课题组前期研究表明，SRPK1 可以增强 NSCLC 的干性，而癌症干细胞与肿瘤耐药的发生密切相关，提示我们，SRPK1 可能在 NSCLC Gefitinib 耐药中起着关键作用。 本文围绕 SRPK1 参与NSCLC Gefitinib 耐药的机制开展实验方法以及相关实验研 究。主要研究内容如下： 1.对Gefitinib 敏感及耐药细胞检测SRPK1 的表达水平，发现SRPK1 在NSCLC Gefitinib 耐药细胞中高表达，在 NSCLC Gefitinib 敏感细胞中低表达并通过 GSEA 分析验证 SRPK1 与Gefitinib 耐药显著相关。 2.在体内体外检测构建的 SRPK1 的高低表达细胞对 Gefitinib 的敏感性，发现高表达 SRPK1 通过抗凋亡促进NSCLC Gefitinib 耐药，而下调SRPK1 的表达则通过促进凋亡 增强Gefitinib 的敏感性。 3.对信号通路激活的情况研究发现，SRPK1 直接与GSK3β 相互作用，增强GSK3β Ser9 的自磷酸化，抑制β-catenin 降解，促进β-catenin 入核，从而激活Wnt/β-catenin 信号通 路及增强其下游抗凋亡相关基因的表达，因此，SRPK1 通过活化 Wnt/β-catenin 信号通 路促进NSCLC 对Gefitinib 的耐药。 I SRPK1 通过促进GSK3β 自磷酸化抑制β-catenin 降解介导NSCLC Gefitinib 耐药的机制研究 综上所述，本研究发现 SRPK1 参与 NSCLC Gefitinib 耐药，并确定 SRPK1 在 Wnt/β-catenin 信号通路中的重要作用，为SRPK1 成为Gefitinib 耐药NSCLC 患者新的 治疗靶点提供科学依据。 关键词： 非小细胞肺癌，Gefitinib 耐药，SRPK1 ，GSK3β II The mechanism of SRPK1 enhanced GSK3β autophosphorylation and inhibited β-catenin degradation to promote NSCLC Gefitinib resistant Abstract 80% of lung cancer types are non-small cell lung cancer (NSCLC), and the fatality rate is the highest among all cancers. NSCLC patients are advanced stage of cancer while diagnosis, and the effect of