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紫外一可见分光光度计
第一部分紫外-可见吸收光谱法的原理
第二部分紫外-可见分光光度计构造与类型
第三部分紫外-可见分光光度计的应用
第四部分紫外-可见吸收光谱分析的条件和影响因素
第五部分仪器的使用操作、维护
第一部分
紫外-可见吸收光谱法的原理
一、基本原理:光的选择性吸收
分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,
发生了电子能级跃迁,而产生了相应的吸收光谱。
属分子吸收光谱。
紫外-可见吸收光谱分析是研究物质在紫外-可
见光波下的分子吸收光谱的分析方法。
紫外-可见区可细分为:
(1)10-200nm;远紫外光区
(2)200400nm;近紫外光区
(3)400-800m;可见光区
、光的吸收定律:
o1.朗伯——比尔定律:A=kbc。
表明
定温度下,一定波长的单色光通过均匀的、非散射的溶液
时,溶液的吸光度与溶液的浓度和液层厚度的乘积成正比。
入射光L
透射光I
A
A:吸光度;描述溶液对光的吸收程度
k:摩尔吸光系数,单位L·mol-l·cm-1;
b:液层厚度(光程长度),通常以cm为单位
c:溶液的摩尔浓度,单位mo|Lˉ1;
o2.摩尔吸光系数:(A=bc)
(1)k与入射波长、溶液的性质以及温度有关。
(2)吸收物质在特定波长和溶剂条件下的特征常数
(3)不随浓度和光程长度b的改变而改变。在温度和
波长等条件一定时,k仅与吸收物质本身的性质有关;
(4)是物质吸光能力的量度,可作为定性鉴定的参数;
(5)同一物质在不同波长下的k值是不同的。在
最大吸收波长λmax处的摩尔吸光系数,常以kmax
表示。Kmax表明了该吸收物质最大限度的吸光能
力,也反映了光度法测定该物质可能达到的最大灵
敏度。
(6)Ⅻmax越大表明该物质的吸光能力越强,用光度
法测定该物质的灵敏度越高。
(7)k在数值上等于浓度为1mol/、液层厚度为1cm
时该溶液在某一波长下的吸光度
、紫外吸收光谱与分子纬构的关系
有机化合物的紫外吸收光谱常被用作结构分析的依据:
的和有机化合物一和烃双其取代衍生物
不饱和脂肪族有
相羟及轭烯
机化合物
羟基化合物
其生物勿
不饱和杂环化合物
第二部分
紫外一可见分光光度计
、紫外可见分光光度计的基本构造
基本构造主要由光源、单色器、吸收池、检测器和显
示器五大部分组成。
QA-l=口
光源单色器样品池检测器显示器
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