党参多糖、炔苷含量测定方法.pdfVIP

附 录 A党参多糖含量测定方法 A.1 仪器 紫外可见分光光度计，具 1 cm 比色皿；分析天平；电热恒温水浴锅；超声波清洗器。 A.2 试剂 D （＋）—无水葡萄糖标准品（纯度 ≥ 98%）； 5%苯酚溶液；硫酸、乙醇等试剂均为分 析纯。 A.3 分析步骤 A.3.1 试样处理 取本品粉末（过 4 号筛） 0.2 g ，精密称定，置于 100ml 圆底烧瓶中，加入 80% 乙醇 50 ml ，水浴回流提取 2 h，滤过，残渣用 80% 的热醇洗涤，放置室温后用 30 ml 蒸馏 水洗涤残渣，残渣连同滤纸置烧瓶中，分别加入 60 ml 沸水 90 ℃ 水浴回流提取 120 mi n，趁热过滤，残渣及烧瓶用热水洗涤，洗液并入滤液，上述步骤重复提取 3 次，放冷后旋 蒸，将滤液移入 100 ml 容量瓶中，用蒸馏水定容至 100 ml 。 A.3.2 标准曲线的制备 取 105 ℃ 干燥至恒重的 D （＋） —无水葡萄糖对照品适量，精密称定，加水制成每 1 ml 含 0.1 mg 葡萄糖的溶液。 精密量取标准溶液 0、0.1 ml 、0.2 ml 、0.4 ml 、0.6 ml 、0.8 ml 、 1.0 ml 置于具塞试管中， 补足蒸馏水至 2.0 ml ，各精密加入 5 ％ 苯酚溶液 1 ml ，快速摇匀， 迅速精密加入硫酸 5 ml ，摇匀，待全部加完后，将全部试管同时放入 100 ℃ 恒温水浴锅 中，当温度重新升至 100 ℃ 开始计时，准确保温 15 min ，取出，然后冷却至室温，以相 应的试剂为空白，在 490 nm 波长下测定吸光度 A 。以吸光度值为纵坐标，以浓度为横坐 标，绘制标准曲线。 A.3.3 测定 吸供试品溶液 0.2 ml ，加蒸馏水补足至 2.0 ml ，按 A.3.2 方法进行测定，记录吸光度 值，与标准曲线比较定量。 A.3.4 结果计算 试样中的党参多糖的含量（ X）以质量分数（ %）表示，按式（ 1）进行计算： （1） 式（ 1）中： A x —— 样品溶液的吸光度； A 标 —— 对照品溶液的吸光度； C 标 —— 对照品中葡萄糖的浓度，单位为毫克每毫升 (mg/ml) m —— 试样质量，质量为克 (g)； 计算结果表示到小数点后两位。 A.3.5 重复性 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的的相对标准偏差应不大于 5 % 。 AA 附 录 B （规范性附录） 党参炔苷含量测定方法 B.1 仪器 高效液相色谱仪（包括在线真空脱气系统、四元泵、自动进样器、柱温箱、二极管阵列 检测器）；超声波清洗器；分析天平。 B.2 试剂 党参炔苷对照品（纯度 ＞ 98%）；乙腈、甲醇等试剂均为色谱纯。 B.3 分析步骤 B.3.1 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂； 流动相为乙腈–水 （28 ∶ 72 ， v/v ）；流速为