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专题二 课题 1 微生物的实验室培养 使用 班级
姓名 小组
【复习目标】
1.了解培养基、消毒、灭菌等基础知识;
2.理解无菌技术的操作。
【自主预习】
一、培养基
1.概念:人们按照微生物对 __ 营养物质 _ 的不同需求,配制出的供其 _生长繁殖 __的营
养基质。
2.种类:按照培养基的物理性质划分
(1)_液体 __培养基:配制成的 __ 液体 ___状态的基质。
(2 )__ 固体 __培养基: 在__液体 ___培养基中加入 ___ 凝固剂 __ ,如琼脂后, 配制成的 ____
固体 ___ 状态的基质,是实验室中最常用的培养基之一,微生物在其上面生长,可形成肉眼
可见 的___ 菌落 ___ 。
3. 组成成分:各种培养基的具体配方 不同 __ ,但一般都有 __ 水___、 __碳源 ___ 、_氮
源__ 、_ 无机盐 ___ ,此外培养基还需要满足微生物生长对 ___PH___ 、_特殊营养物质 __ 以及
__氧气 ___ 的需求。
二、无菌技术
获得纯净培养物的关键是 ___ 防止外来杂菌的入侵 __ 。
1.消毒是指使用较为温和 _____ 的物理方法或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分 __
__对人体有害 ___ 的微生物(不包括 __ 芽孢 __和__孢子 ____ )。实验室常用的消毒方法有 ____
煮沸消毒法 ___ 、__ 巴氏消毒法 ___ 、____ 化学药剂消毒法 ____ 。
2. 灭菌是指使用 ____强烈 _____ 的理化因素杀死 ___物体内外所有 ____ 的微生物,包括 __
芽孢 ___和 ___孢子 __ 。常用的灭菌方法有 ____ 灼烧灭菌 ___ 、__干热灭菌 __ 、___ 高压蒸汽灭
菌____ 。
3. 实验操作中避免杂菌的污染,主要包括四方面的内容:
(1)对实验操作的 __ 空间 ____ 、操作者的 ___衣着和手 _____进行清洁和消毒。
(2 )将用于微生物培养的 __器皿 __ 、___接种用具 ____ 和___培养基 ____ 等进行灭菌。
(3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在 ____酒精灯火焰 ____ 附近进行。
(4 )实验操作时应避免 ___ 已经灭菌处理 ____ 的材料用具与周围物品相接触。
4.在实验室中,切不可吃东西、喝水,离开实验室时一定要洗手,以防止被 _____微生物污
染____ 。使用后的培养基丢弃前一定要进行 ___灭菌 __ 处理,以免污染环境。
三、分离纯化大肠杆菌
本实验使用的培养基为 ___牛肉膏蛋白胨 ___ 培养基。进行大肠杆菌的纯化培养,可分
为 _制备培养基 ___ 和___纯化大肠杆菌 ___两个阶段。
1.制备培养基的一般步骤为: __计算 ___ 、__称量 ___、__ 溶化 __、__灭菌 _ 、_ 倒平板 __ 。
2.纯化大肠杆菌: 微生物接种最常用的方法是 __平板划线法 ___和____稀释涂布法 ____ 。
(1)平板划线法通过 ___ 接种环 ___ 在琼脂固体培养基表面连续 ___划线 __的操作,将___
聚集 __ 的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
(2 )稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的 ___ 梯度稀释 ___ ,然后将不同稀释度的
菌液 ___分布涂布 __ 到琼脂固体培养基的表面,进行培养。
3.菌落的概念: __ 由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体
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