第八章-基因工程育种.ppt

第八章 基因工程育种;第一节 基因工程育种概述 第二节 重要的工具酶 第三节 常用的载体 第四节 基因工程育种基本过程 第五节 基因工程育种的应用;第一节 基因工程育种概述;Cohen和Boyver l973年首次成功完成了DNA分子的体外重组实验，宣告基因工程(gene engineering)的诞生，也为微生物育种带来了一场革命。 ;基因工程育种的优势 与传统育种方法不同的是，基因工程育种可以突破物种间的障碍，实现真正意义上的远缘杂交。而且这种远缘既可跨越微生物之间的种属障碍，还可实现动物、植物、微生物之间的杂交。同时，利用基因工程方法，人们可以“随心所欲”地进行自然演化过程中不可能发生的新的遗传组合，创造全新的物种。这是一种自觉的、能像工程一样事先进行设计和控制的育种技术，是最新、最有前途的育种方法。;第二节 重要的工具酶;工具酶 基因工程中的工具酶主要是指用于DNA和RNA分子的切割、连接、聚合、修饰、反转录等有关的各种酶系统。;一、限制性核酸内切酶(RE) 是一类由细菌产生的能专一识别双链DNA中的特定碱基序列、并水解该点磷酸二酯键 的核酸内切酶，简称限制酶或切割酶。 根据限制酶的作用特性，一般分为三类： ——Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型， 其中常用的是Ⅱ型限制酶。 ; 限制酶（Ⅱ型）识别及切割位点 特异识别及切割4?8个bp长度且具有回文序列的DNA片断，主要产生3种缺口： 5ˊ－粘性末端 3ˊ－粘性末端 平头末端 回文序列 是指该部位的核苷酸序列呈180O旋转对称; 粘性末端 是指经内切酶特异切割后产生的5ˊ－末端突出或3ˊ－末端突出的碱基序列，相互具有互补性。;　　文艺控女生专属简单有范的个人签名　　1、朝如青丝暮成雪。　　2、我们的爱情像萤石一样美　　3、或许时光匆匆只是你忘了带我走 -　　4、其实你并不知道在我心中你最美。　　5、你嘴角30度的微笑，百度搜索不到　　6、我要变成一个可以让你永远感到温暖的小太阳　　7、我用我千世万世的命，爱你千世万世。　　8、有的人像风筝一样 一断线就回不来了。　　9、〔　　　暗里着迷　　　〕　　10、我有两个影子，一个在前，一个在后。伴我左右　　11、回忆起绽放的那一个宁夏，仿佛可以触摸彩虹。　　12、早起的时候发现下雪了，薄薄的淡淡的，挺美。　　13、街灯下的橱窗，有一种落寞的温暖。　　14、我想未来的 某一天 穿最美的婚纱 嫁最爱的你　　15、听说每一个爱向日葵的人，都能带给人温暖，因为他们心底住着太阳。　　16、看天空的云，堆在了一起。看躺在地上的你，微笑的脸庞。　　17、我想当个歌颂者，在温阳柔风中轻吟着。　　18、┈┾ 和你牵手的那一刻 ，嘈杂的世界顿时安静，仿佛只有你我╭ァ　　19、心底最柔软的阳光、来自于你孩子般的模样　　20、我会带着你们的晚安把梦做到最美　　21、纸钱折成的花在火焰下格;其它特殊性质 的Ⅱ型限制酶;同裂酶 ;同裂酶——同识同切;同裂酶——同识异切;同 尾 酶;可变酶; 常用限制性核酸内切酶的特性;二、DNA聚合酶; ㈠ DNA聚合酶Ⅰ ; DNA pol Ⅰ应用;E. coli DNA pol Ⅰ催化切口平移;㈡ Klenow片段（DNA pol.大片断）; Klenow片段用途; ㈢ Taq DNA pol（耐热DNA聚合酶）;三、逆转录酶; 逆转录酶的应用： ⑴ 将mRNA逆转录成cDNA，构建cDNA文库； ⑵ 补平和标记5ˊ-末端突出的DNA片段； ⑶ 代替Klenow酶用于DNA序列分析； ⑷ 制备杂交探针等。;四、DNA连接酶(DNA ligase) ;五、碱性磷酸酶 ;六、末端 （脱氧核苷酸）转移酶(TdT) ;重要的工具酶;第三节 常用的载体;载体(vector) 是将外源DNA(目的DNA)片断引入宿主细胞的运载工具，其化学本质为DNA 。;一、载体必须具备的基本条件;二、载体的种类;三、常用的载体 ;广泛应用的质粒： pBR32质粒、pUC系列等; pBR322质粒;pUC系列质粒;; λ噬菌体感染细菌后的溶菌性生长和溶源性生长 溶菌性生长（lytic pathway） 噬菌体感染细菌后，借助其2个COS位点互补成环，在宿主菌体内连续复制，合成大量基因产物，进而装配成噬菌体颗粒，裂解宿主菌，释放出来的噬菌体又可感染其他细菌。 溶源性生长(lysog