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ICS? FORMTEXT 07.100.99
FORMTEXT B 41
FORMTEXT ?????
DB FORMTEXT 15
FORMTEXT 内蒙古自治区地方标准
DB FORMTEXT 15/ FORMTEXT XXXXX— FORMTEXT XXXX
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FORMTEXT 动物垫料中大肠埃希氏菌O157:H7/NM检测方法
FORMTEXT Method for Detecting Escherichia coli O157: H7/NM in animal bedding
FORMTEXT 点击此处添加与国际标准一致性程度的标识
FORMDROPDOWN
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FORMTEXT XXXX - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX发布
FORMTEXT XXXX - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX实施
FORMTEXT 内蒙古自治区市场监督管理局???发布
DBXX/ XXXXX—XXXX
PAGE 11
前??言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由中华人民共和国呼和浩特海关提出并归口。
本标准起草单位:中华人民共和国呼和浩特海关、二连浩特市疾病预防控制中心、内蒙古自治区农牧业科学院。
本标准主要起草人:赵治国、崔强、郭文丽、延涵、王海艳、陈林军、敖威华、韩祎陟、罗晓平、李军燕。
动物垫料中大肠埃希氏菌O157:H7/NM检测
范围
本标准规定了动物垫料中大肠埃希氏菌O157:H7/NM的定性检测方法、设备和材料、培养基和试剂。
本标准适用于动物垫料中大肠埃希氏菌O157:H7/NM定性检测。
规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB 19489 实验室 生物安全通用要求
GB/T 33682 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴别微生物方法通则
SN/T 1538.1 培养基制备指南 第1部分:实验室培养基制备质量保证通则
SN/T 1538.2 培养基制备指南 第2部分:培养基性能测试实用指南
术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
动物垫料 animal bedding
用于吸收动物排泄物,使动物保持舒适生活环境的铺垫物。包括动物笼内非直接与动物机体接触的铺垫物。
4 设备和材料
4.1 冰箱:2 ℃~5 ℃。
4.2 恒温培养箱:36 ℃±1 ℃。
4.3 均质器。
4.4 振荡器。
4.5 电子天平:感量0.1 g,0.0001 g。
4.6 全自动微生物生化鉴定系统。
4.7 飞行时间质谱仪。
4.8 酶联免疫分析仪。
4.9 二级生物安全柜。
4.10 pH 计。
4.11 微量移液器。
4.12 无菌锥形瓶:容量500 mL,250 mL。
4.13 无菌吸管:1 mL(具0.01 mL刻度)、10 mL(具0.1 mL刻度)或微量移液器及吸头。
4.14 无菌培养皿:15 mm×90 mm。
4.15 无菌棉签。
4.16 无菌镊子。
4.17 无菌剪刀。
4.18 无菌勺。
4.19 无菌玻片。
4.20 无菌接种环。
5 培养基和试剂
5.1 实验用水符合GB/T 6682的要求。
5.2 改良EC肉汤(mEC+n):见附录A.2。
5.3 改良山梨醇麦康凯琼脂(CT-SMAC):见附录A.3。
5.4 三糖铁琼脂(TSI):见附录A.4。
5.5 营养琼脂:见附录A.5。
5.6 半固体琼脂:见附录A.6。
5.7 月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-MUG(MUG-LST):见附录A.7。
5.8 氧化酶:见附录A.8。
5.9 革兰氏染液:见附录A.9。
5.10 大肠埃希氏菌O157显色培养基。
5.11 大肠埃希氏菌O157和H7诊断血清。
5.12 生化鉴定试剂盒。
5.13 革兰氏阴性菌生化鉴定卡。
5.14 飞行质谱仪靶板。
5.15 大肠埃希氏菌O157:H7/NM ATCC 35150或等效标准菌株。
5.16 EHEC肠道出血性大肠埃希氏菌 ATCC 35130或等效菌株。
5.17 大肠埃希氏菌株 ATCC 25922或等效标准菌株。
6 检验程序
大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验流程序见图1。
样品制备
样品制备
检样
检样25g或25cm2样液+225mL mEC+肉汤
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