生物化学方法及其.ppt

4．比浊法。比浊法是利用混悬溶液中颗粒对光线产生散射特性进行测定。其测定的理论、方法和计算等类似于比色分析法，因此基本上任何一种光电比色计或分光光度计都能用于比浊测定。 以上这些技术，被称为生化的四大技术，很传统的。大体可以满足静态生化、动态生化的检测，而机能生化则首先有赖于对化学物质的结构认识，这样的研究目前十分热门，自然杂志专门有关于蛋白质三级机构图的专刊，目前积累迅速。而研究则是一条长链，有许多环节构成，投入成本高。 全自动生化检测仪 （六）分子杂交技术（详见有关章节） 二、用生物化学方法研究中医的现状 该章节引用了大量的国内研究进展资料，值得仔细阅读。 （一）物质代谢 介绍了：阴虚、阳虚、心气虚、肝气虚、脾虚、肺虚、肾虚、体质学说与物质代谢（其中：毛良、顾文聪（我校教师）） 1．阴虚、阳虚与物质代谢 毛良是我校的生化专业的老教师。 2．心气虚与物质代谢 心气虚证患者红细胞SOD活性明显下降、血清LPO含量显著升高，推测由于红细胞SOD活性下降不能保护心肌免受超氧自由基的攻击，以致产生心气虚的临床症状。心气虚患者血浆核酸总量及DNA、RNA含量均低于正常对照组，提示心气虚患者蛋白质合成功能有一定的障碍。 3．肝气虚证与物质代谢 4．脾虚与物质代谢 脾虚患者： 柠檬酸刺激后唾液淀粉酶活性下降。 血清胃泌素和胰淀粉酶活性低下，胃肠蠕动紊乱，小肠吸收功能低下。说明脾虚患者的胃肠功能确有紊乱。 木糖排泄率较正常人显著降低，而且食少、腹胀满、大便不调、神疲气短等脾虚四大主症与木糖排泄率下降有一致性的规律。 血清淀粉酶及其同功酶和胰脂肪酶均显著下降，且食欲减退、食后腹胀与大便溏泄等脾气虚的三个主症与之呈正相关，表明胰腺外分泌功能的降低可视为脾气虚证的特异性诊断指标之一，且淀粉酶总活性的降低取决于胰淀粉酶同功酶的下降，而与唾液淀粉酶无关，为脾气虚证诊断提供了一个更准确有效的实验指标。 5．肺虚与物质代谢 6．肾虚与物质代谢 7．体质学说与物质代谢 （二）能量代谢 介绍了：心气虚、肝血虚、脾虚证、体质学说与能量代谢（其中匡调元为我校教师） 1．心气虚证与能量代谢 2．肝血虚证与能量代谢 3．脾虚证与能量代谢 脾气虚患者肌纤维的肌酸磷酸激酶（CPK）、琥珀酸脱氢酶、辅酶1-四氮唑还原酶（NADH-TR）活性、肌球蛋白腺苷三磷酸酶（M-ATPase）活性，以及肌糖原含量均减少，线粒体发生改变，骨骼肌有氧氧化效率降低，糖酵解供能途径障碍，能量代谢受阻；实验还发现CPK和肌型肌酸磷酸激酶（CPK-MM）活性的降低与脾气虚的轻重程度有量的相关性。 脾气虚大鼠骨骼肌细胞ATP含量和能荷值显著减小，与无氧酵解相关的乳酸脱氢酶（LDH）以及有氧氧化相关的琥珀酸脱氢酶（SDH）活性显著升高，提示能量代谢异常，与之相关的微量元素锌和铁含量也相应升高，而与肌肉收缩有关的元素铜、砷、钠减少而钙增多。红细胞膜Na+-K+-ATPase活性也显著低于正常组。 4．体质学说与能量代谢 （三）神经内分泌 介绍了：阴虚、阳虚、心气虚、肝、脾虚、肺虚、肾虚、与神经内分泌（其中赵伟康、金国琴、为我校教师，沈自尹、王文健华山医院藏象研究室，在肾虚证研究方面全国领先） 1．阴虚阳虚与神经内分泌 2．心气虚与神经内分泌 3．肝与神经内分泌 4．脾虚证与神经内分泌 5．肺虚证与神经内分泌 6．肾虚证与神经内分泌 沈自尹等从1959年，在“肾”本质的研究中，得到肾阳虚证具有下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴功能紊乱的结论，这一结论经历了全国七个省市和日本京都病院的重复验证。他们从1979年起，通过选择符合典型肾阳虚证患者与正常组、同病无特殊见证组下丘脑-垂体及其所属三个靶腺轴功能的全套测定的对比研究，结果显示肾阳虚证不仅表现为肾上腺皮质轴功能紊乱，而且在不同的靶腺轴、不同环节、不同程度上呈现隐潜性变化。采用了温补肾阳法治疗后，靶腺功能明显恢复。由于累及三个靶腺轴，由此可以推论肾阳虚证主要发病环节是下丘脑（或更高中枢）的调节紊乱。 （1）下丘脑-垂体-性腺轴与肾虚 （2）下丘脑-垂体-肾上腺轴与肾虚 沈自尹等实验发现，35例肾阳虚证患者尿17羟均值治疗后显著高于治疗前，24例肾阳虚证患者ACTH滴注试验呈延迟反应，治疗后复查其值均恢复至正常；6例肾阳虚证患者血浆ACTH浓度治疗后显著高于治疗前；7例肾阳虚者血皮质醇昼夜节律呈异常曲线者，有4例治疗后得以恢复。赵伟康等经动物试验发现补肾益精方药固真方能明显提高老年大鼠（肾虚衰老）海马细胞降低的糖皮质激素受体（GCR）数，提高下丘脑降低的NE、DA和5-HT含量，降低老年大鼠异常升高的血浆皮质酮，使之趋于正常青年对照组。 （3）下丘脑-垂体-甲状腺轴与肾虚 沈自尹等观察了8例肾阳虚者血清总T3含量，与治疗