浆膜腔积液粘蛋白定性检查Rivalta法作业指导书.doc

浆膜腔积液粘蛋白定性检查Rivalta法作业指导书 1. 实验原理 渗出液中可含多量浆膜粘蛋白，在酸性条件下可产生白色雾状沉淀。 2. 标本采集： 2.1 标本种类：浆膜腔积液标本由临床医师行胸腔穿刺术，腹腔穿刺术或心包穿刺术分别采集。 2.2 标本要求：送验标本最好留取中段液体于消毒容器试管或消毒瓶内，常规及细胞学检查约留取2毫升。 2.3 为防止出现凝块，细胞变性、细菌破坏自溶等，除应即时送验及检查外，常规及细胞学检查宜用EDTA·K2抗凝。 3. 标本储存：立即送检。 4. 标本运输：室温运输。 5. 标本拒收标准：污染，久置标本。 6 实验材料： 量筒，乙酸。 7. 操作步骤：取100ml量筒，加蒸馏水100ml，滴入乙酸0.1ml（pH3～5），充分混匀，静止数分钟，将穿刺液靠近量筒液面逐滴轻轻滴下，在黑色背景下，观察白色雾状沉淀的发生及其下降速度等。 结果判断与分析 阴性：清晰不显雾状； ±：渐呈白雾状； ＋：甲后呈白雾状； 2+：白薄云状； 3+：白浓云状。 在滴下穿刺液后，如见浓厚的白色云雾状沉淀很快地下沉，而且形成较长的沉淀物，即Rivalta反应阳性。如产生白色浑浊不明显，下沉缓慢，并较快消失者为阴性反应。 9. 质量控制：进行室内工作人员比对分析，要求差异在10％以内。 临床意义： 10.1 漏出液（transusate）为非炎症性积液，其形成常见原因为：①血管内胶体渗透压下降；当血浆白蛋白浓度明显减少时，如肾病伴有蛋白大量丢失、重度营养不良、晚期肝硬化、重症贫血，一般血浆白蛋白低于25g/L，就有出现浆膜腔积液的可能；②毛细血管流体静脉压升高；如静脉回流受阻静脉栓塞、肿瘤压迫、充血性心功能不全和晚期肝硬化等；③淋巴回流受阻止如淋巴管被血丝虫阻塞或者淋巴管被肿瘤所压迫等，这些胸、腹腔积液有或能是乳糜样的；④水、钠潴留可引起细胞外液增多，常见于晚期肝硬化、充血性心力衰竭和肾病等。 10.2 渗出液（exudate）多为炎症性积液。炎症时由于病原微生物的毒素、缺氧以及炎症介质作用使用血管内皮细胞受损，血管通透性增加，以致血管内大分子物质如白蛋白甚至球蛋白和纤维蛋白原都能通过血管壁而渗出，在渗出过程中，还有各种细胞成分的渗出。当血管严重受损，红细胞也外溢，因此炎性渗出液中含有红细胞也是炎症反应的特征。渗出液产生多为细菌感染所致少数见于非感染病因，如外伤、血液、胆汁、胰液、胃液等刺激后。此外恶性肿瘤也可引起类似渗出液的积液。渗透出液与漏出液鉴别见下表。 漏出液与渗出液的鉴别 漏出液 渗出液 原因 非炎症 炎症、肿瘤或物理、化学刺激所致 外观 淡黄 不定可为黄色、血色、脓样、乳糜样 透明度 透明，偶见微混 多为混浊 比密 1.015 1.018 凝固 不凝 常自凝 粘蛋白试验 阴性 阳性 PH 7.4 6.8 蛋白质定量 25g/L 30g/L 积液总蛋白/血清总蛋白 0.5 ≥0.5 葡萄糖 3.3mmol/L，与血糖相近 可变化，常3.3mmol/L，低于血糖 LD 200U/L 200U/L 积液LD/血清LD 0.6 ≥0.6 细胞总数 常100×106/L 常500×106/L 白细胞分类 以淋巴细胞及间皮细胞为主 因病因不同而异，一般急性感染以中性粒细胞为主，慢性以淋巴细胞为主 癌细胞 未找到 可找到癌细胞或异常色体 细菌 未找到 可找到病原菌 常见疾病 充血性心力衰竭、肝硬化和 肾炎伴低蛋白血症 细菌感染、原发性或转移性肿瘤、急性胰腺炎等。 11. 方法学评价：参见浆膜腔积液化学检查作业指导书。 12. 操作注意事项：浆膜腔积液标本必须立即送验及时检查，放置过久将影响检验结果。 13. 参考文献： 中华人民共和国卫生部医政司编。全国临床检验操作规程（第二版）148-149页。