浆膜腔积液化学检查作业指导书.doc

浆膜腔积液化学检查作业指导书 1. 实验原理 同血清相应检测项目相同。 2. 标本采集： 2.1 标本种类：浆膜腔积液标本由临床医师行胸腔穿刺术，腹腔穿刺术或心包穿刺术分别采集。 2.2 标本要求：送验标本最好留取中段液体于消毒容器试管或消毒瓶内，至少留2毫升。 2.3 为防止出现凝块，细胞变性、细菌破坏自溶等，除应即时送验及检查外，生化检查标本宜用肝素抗凝。 3. 标本储存：立即送检。 4. 标本运输：室温运输。 5. 标本拒收标准：污染，久置标本。 6 实验试剂：参见相应血清检测项目作业指导书。 7 实验仪器：参见相应血清检测项目作业指导书。 8. 操作步骤 8.1 PH测定时标本应抽取在肝素化的真空注射器具内，注意与外界空气隔绝。即时送验及时检查。 8.2 蛋白质、葡萄糖、酶学定量测定方法与血清定量相同。 结果判断与分析 9.1 PH：漏出液PH7.4；渗出液一般偏低。化脓性感染时积液PH7.0,同时伴有葡萄糖含量降低。PH降低还可见于类风湿病、结核、恶性肿瘤、红斑狼疮性胸膜炎。胸水PH在6以下，对诊断食道破裂有参考价值。 9.2 蛋白定量：一般认为渗出液蛋白质含量大于30g/L，漏出液常小于25g/L。蛋白质如为25-30g/L，则难以判明其性质，蛋白电泳时漏出液的α2和γ球蛋白等大分子蛋白质比例低于血浆，而蛋白质相对较高。但渗出液的蛋白电泳谱与血浆相近似，其中大分子量蛋白质显著高于漏出液。 9.3 葡萄糖定量：漏出液葡萄糖含量比血糖稍低些。渗出液葡萄糖因受细菌或炎症细胞的酵解作用，积液中葡萄糖含量降低，尤其是化脓性细菌感染时更低，结核性次之。 9.4 酶学检查浆膜腔种液中所含的各种酶有数十种，其中有诊断价值的有以下几种。 9.4.1 乳酸脱氢酶：浆膜腔积液中LD200U/L，积液LD/血清LD比值0.6可作为渗透出液的指标。在各类渗液中经化脓性感染和积液LD活性最高，其次是癌性种液，结核性略高于正常。LD同功酶测定如LD3、LD4、LD5或仅LD5增高可疑为恶性肿瘤。 9.4.2 溶菌酶：正常胸腹水含量0-5mg/L，94%结核性积液中溶菌酶含量超过30mg/L，明显高于癌性积液、结缔组织病。如果用积液和血清中溶菌酶比值表示，也是结核性最高，因此测定胸腔积液中溶菌酶对结核性胸膜炎的诊断有帮助，连续观察可估计预后。如同进测定胸腔积液中溶菌酶和LD时，通常结核性两者均升高、心力衰竭引起的漏出液两者均低，癌性胸腔积液时溶菌酶低而LD活性高，此种分离现象是癌性胸腔积液析特点。 9.4.3 腺苷脱氢酶（ADA）：一般在结核性积液中ADA活性升高且幅度最大，癌性次之，漏出液最低。ADA大于40U/L应考虑为结核性。 9.4.4 淀粉酶：大多数胰腺炎患者及胰腺创伤等所致腹腔积液中，淀粉酶活性可高达血清淀粉酶的数倍至几十倍。当食道破裂时唾液经食道穿孔处流进胸腔，此时胸腔积液淀粉酶也升高，检查胸腔积液中AMY对食道穿孔早期诊断也是有价值的。 9.4.6 碱性磷酸酶：大多数小肠扭转穿孔患者的腹腔穿刺液中碱性磷酸酶活性升高，约为血清碱性磷酸酶的2倍，发病2-3小时即升高，并随病情进展而增加。 9.4.7 其它 （1）铁蛋白（feritin，Ft）：癌性积液中铁蛋白多大于600μg/L，结核性时也升高，因此铁蛋白对癌性和结核性鉴别缺乏特异性。如果与溶菌酶一起测定则有价值，癌性腹水铁蛋白明显升高，腹水Ft/血清Ft1，而溶菌酶含量不高；结核性者两者均升高，溶菌酶升高极为明显。 （2）纤维连结蛋白（fibronectin，FN）：纤维连结蛋白是种多糖蛋白。有报告癌性腹水FN为173.9±65.9mg/L，非癌性腹水为13.4±6.8mg/L(P0.001)，认为FN对癌性腹水的诊断价值较大。同时提出腹水FN75mg/L，可高度怀疑癌性腹水，并认为肿瘤细胞可合成分泌FN。 （3）纤维蛋白原降解产物（fibrin degradation products，FDP）：在癌性积液中FDP明显高于结核性，而结核性又高于肝硬化引起的积液。因此积液中FDP≥1000mg/L时，考虑癌性可能性较大。 （4）C反应性蛋白（C-resctive protein，CRP）：CRP为急性时相反应蛋白，可用于漏出液及渗液的鉴别判断。CRP10mg/L为漏出液，CRP10mg/L为渗出液。其敏感性、特异性约为80%左右。 10. 质量控制：参照相应血清检测项目。 11. 方法学评价:通过外观、比密、凝固、粘蛋白试验及细胞计数来鉴别渗出液和漏出液，有时也难准确判断，临床符合率仅约60%，远远满足不了临床需要。检测浆膜腔积液和血清的蛋白质含量及乳酸脱氢酶活性，当积液LD200U/L；积液LD/血清LD比值0.6，积液总蛋白/血清总蛋白比值0.5，如三项同时存在时可以诊断为渗出