临床细菌培养鉴定流程与报告.ppt

3．分离培养 ⑴一般培养: 用定量接种环或无菌微量加样器取尿液0.001ml或0.01ml(已使用抗生素患者),接种于血平板和麦康凯/中国兰平板,不能定量时需用倾碟法记数，35～37℃培养18～24小时。 (2)特殊培养: 对临床要求真菌、淋病奈瑟菌及结核菌等培养者，根据细菌所需条件接种相应特殊培养基，放置相应条件下进行培养。 4．结果分析及报告 ⑴结果分析: 一般单种细菌菌落数＞105cfu/ml可能为感染，需要进一步鉴定和做药敏试验；＜104cfu/ml可能为污染；在两者之间需要根据病人的临床表现进行评估。对于导尿标本＞103cfu/ml即为感染；耻骨上膀胱穿刺标本任意数目即为感染，均需进一步鉴定和做药敏试验。 (2)报告方式 初步报告：在分离出细菌后，进行革兰氏染色，作出初步报告。 最终报告：有意义的阳性结果报告，应报告菌落计数、细菌种名及药敏结果。 无意义的阳性结果报告，报告菌落数、革兰氏染色形态特征，并注明是纯培养或是混合菌生长。 阴性结果报告:应报告无菌生长和菌落计数＜1000cfu/ml或 ＜100cfu/ml尿。 （四）粪便 急性感染性腹泻可以由细菌、病毒及原虫引起，实验室常规检查是细菌培养。每种感染性腹泻的致病菌因其独特的致病机理而引起一系列不同的典型症状，这些症状和详细的病史能为诊断腹泻疾病类型提供依据。因此，为了查找腹泻病因，必须了解患者的病史即：症状、发病时间、年龄、旅游史、进食情况和使用抗菌素情况。 致病菌能够破坏宿主的防御系统，其致病机理是细菌产生毒素和对人体组织的侵袭性，值得注意的是有些细菌既具有侵袭性又能产生毒素。抗生素治疗可以破坏宿主的正常菌群，导致某些细菌如艰难梭菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和念珠菌等过度生长，也可引起腹泻。沙门氏菌、志贺氏菌、气单胞菌和邻单胞菌应作为实验室常规培养的主要腹泻病原菌。 粪便标本中常见的病原菌 革兰氏阳性菌 革兰氏阴性菌 金黄色葡萄球菌 伤寒及其他沙门菌 厌氧链球菌种 志贺菌属 结核分枝杆菌 致病大畅埃希菌 产气荚膜梭菌 弧菌属菌种 艰难梭菌 气单胞菌和邻单胞菌 小肠结肠炎耶尔森菌 弯曲菌 2．标本的采集与运送 ⑴粪便培养检查的送检指征(出现以下任何一种情况时建议做粪便培养) a.粪便涂片镜检白细胞＞5/HP b.重症腹泻 c.体温＞38.5℃ d.血便 e.便中有脓液 f.未经抗菌药物治疗的持续性腹泻患者 g.来自疫区的患者 (2)标本采集 a.标本采集尽可能在发病早期和使用抗菌药物治疗之前 b.自然排便采集粪便标本时，取有脓血、粘液、组织碎片部分的粪便，液体粪便则取絮状物 c.直肠拭子采集粪便标本，适用于排便困难患者和婴幼儿 ⑶标本运送 a.粪便标本应尽快送检，室温条件下不能超过2小时。如不能及时送检，可加入pH7.0的磷酸甘油或转运培养基，但不易超过24小时 b.直肠拭子采集的标本必须置于适当的运送培养基内，转运时间不宜超过2小时 c.高度怀疑霍乱弧菌感染的标本运送必须符合特殊标本的安全要求 3. 分离培养与镜检 粪便标本直接镜检找到大量多核白细胞，提示侵袭性致病菌感染。如果肠道菌群紊乱，革兰氏染色镜检结果可以提示是酵母菌还是葡萄球菌感染。 ⑴腹泻病原菌常规培养 腹泻病原菌种类繁多,实验室不可能对所有可能引起腹泻的病原菌都进行培养。为保证获得较高的检出率,可以对患者进行腹泻病原菌常规培养,包括沙门氏菌、志贺氏菌、气单胞菌、邻单胞菌、弧菌，也包括可引起菌群失调的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和酵母菌。粪便标本至少接种SS、中国兰等培养基，必要时加血平板，培养18～24小时观察结果。 (2)腹泻病原菌特殊培养 根据所疑病原菌的生长要求,选择合适的选择培养基进行分离培养鉴定。 4．结果分析及报告 阳性结果：报告细菌种名和药敏结果 阴性结果：常规细菌培养阴性应报告“未检出常规培养病原菌” 特殊细菌培养阴性应报告“相应细菌阴 性筛选结果” （五） 脓汁（病灶分泌物） 微生物存在于周围环镜中，也存在于皮肤、粘膜表面，它们通过破损的皮肤或粘膜进入通常无菌的组织引起感染，在一个或多个解剖部位形成小脓庖或包裹性脓肿。细菌和真菌（条件致病菌或致病菌）都可导致炎性渗出，渗出物由白细胞、入侵病原体、体液及纤维蛋白混合组成，即：脓汁。病毒感染很少出现脓性分泌物。