药物分析常用仪器使用.PPT

* * 大家好 第二章 药物分析方法 ——分析化学部分 第二章 第三节 仪器分析方法概述 分类 长春中医药大学 美国气相色谱仪 国产气相色谱仪 5.2 气相色谱法 第五节 色谱法 chromatography Gas Chromatography,GC 气相色谱法是采用气体作为流动相的一种色谱分析法。在此法中，载气（不与被测物作用，用来载送试样的惰性气体，如氢气、氮气等）载着欲分离的试样通过色谱柱中的固定相，使试样中各组分分离，然后分别检测。检测器信号由记录仪记录，得到“色谱图”。 一、气相色谱法的特点 ①高效能 可以分析沸点十分相近的组分和极为复杂的多组分混合物 ②高选择性 可分离同系物、同分异构化合物。 ③高灵敏度 可以检测出10-11g～10-13g物质 ④分析速度快 一般分析可在几分到几十分内可以完成，某些快速分析1s内可以分析数个组分。 1．色谱常用术语 二、气相色谱法的基本概念 ①色谱流出曲线 是由检测器输出的电信号强度对时间作图所绘制的曲线，又称为色谱曲线图或色谱图。 ②基线 是在操作条件下，没有组分流出时的流出曲线。稳定的基线应是一条平行于横轴的直线。 噪音：使基线发生细小的波动的现象 基线是在实验操作条件下，反映检测器系统噪音随时间变化的曲线。 ③色谱峰 是流出曲线上的突起部分。正常色谱峰为对称形正态分布曲线。 不正常色谱峰有两种：拖尾峰和前延峰。 拖尾峰前沿陡峭，后延平缓 前延峰前沿平缓，后延陡峭 色谱峰的对称与否可用 对称因子（?s） 或叫拖尾因子，来衡量。 ?s=W0.05h/2A =(A+B)/2A ④色谱峰的区域宽度 峰宽(W)与半峰宽(W1/2) ★★峰宽(W) 从色谱峰两侧的转折点(拐点)作 切线，在基线上的截距叫峰底宽, 简称峰宽； ★★半峰宽(W1/2) 峰高一半处色谱峰的宽度叫半峰宽。 由于色谱峰顶呈圆孤形，色谱峰的半峰宽并不等于峰底宽的一半。 ⑤峰高和峰面积 ★★峰高(h) 是组分在柱后出现浓度极大时的 检测信号，即色谱峰顶至基线的 距离。 ★★峰面积(A) ⑥保留值 ★ ★保留时间(tR):是指被测组分从进样开始到柱后出现浓度最大值时所需的时间，=组分在流动相中停留的时间 + 在固定相中所停留的时间 ★ ★调整保留时间(tR′)：组分的保留时间与死时间的差值： tR′=tR-t0 它表示与固定相发生作用的组分比载气在色谱柱中多滞留的时间，实际上是组分在固定相中所滞留的时间。 ★ ★保留体积（VR ）：从进样开始到柱后出现浓度最大值所需要的载气体积 VR=F0·tR ★ ★调整保留体积（ VR′ ）：指扣除死体积后的保留体积 VR′= t0′·F0 ★ ★死体积（V0 ）：不与固定相作用的组分从进样到柱后出现浓度最大值所需要的载气体积。若载气的体积流速为F0，则死体积为 V0=F0·t0 ⑦分离度（resolution） 相邻两色谱峰保留值之差与两组分色谱峰底宽度平均值之比，用R表示。分离度可以用来作为衡量色谱峰分离效能的指标。 ★ R 越大，表明两组分分离效果越好 ★ 保留值之差取决于固定液的热力学性质 ★ 色谱峰宽窄反映色谱过程动力学因素及柱效能高低 R=1.5 R=0.75 R=1.0 响应信号 保留时间 t, min 对于峰形对称且满足正态分布的色谱峰： R=1, 分离程度为98%； R=1.5，分离程度可达99.7%。 所以R=1.5时可认为色谱峰已完全分开。 三、气相色谱结构流程 process of gas chromatograph 1-载气钢瓶；2-减压阀； 3-净化干燥管；4-针形阀；5-流量计;6-压力表；4-针形阀；5-流量计;6-压力表； 9-检测器；10-放大器；11-温度控制器；12-记录仪； 载气系统 进样系统 色谱柱 检测系统 温控系统 结构流程 四、气相色谱仪主要部件 main assembly of gas chromatograph 1. 载气系统 包括气源、净化干燥管和载气流速控制； 常用的载气有：氢气、氮气、氦气； 净化干燥管：去除载气中的水、有机物等杂质（依次通过分子筛、活性炭等）； 载气流速控制：压力表、流量计、针形稳压阀，控制载气流速恒定。 液体进样器：