机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立.pptVIP

急性肾衰竭动物模型的建立 【实验目的】 1.学习复制急性肾衰竭动物模型的方法 。 2.观察急性肾衰竭时机体的典型表现及血 酐水平的变化。 3.掌握急性肾衰竭的概念及发病机制 。 【实验原理】 【实验动物】 健康家兔，雄性，体重1.5~1.8Kg 【实验器材和药品】 20%乌拉坦溶液、庆大霉素注射液（1ml:4万单位）、150U/ml肝素、0.9%生理盐溶液、苦味酸 BL-420F实验系统、哺乳动物手术器械一套、动脉导管、动脉夹、膀胱导尿管、注射器（2ml、5ml）、皮头针一套、水浴箱、离心机、丝线 【实验步骤】 血、尿肌酐测定方法（见表1）和内生肌酐清除率的计算从颈总动脉取血置盛有肝素的离心管内，离心后取血浆，按下表进行实验。 表1 血浆和尿液肌酐含量测定 计算： 【观察项目】 表2 处理前和处理后对照组家兔各指标变化 表3 处理前和处理后实验组家兔各指标变化 【预期实验结果】 二组家兔兔子血压升高，呼吸加深加快，心率加快，尿量减少，血/尿肌酐的浓度增高，内生肌酐清除率升高，各项症状明显易于测定。 正常肾脏切面图 急性肾衰竭肾脏切面图 急性肾衰竭镜下图 【注意事项】 1.选择体重相差不超过250g的家兔进行对照 2.注意麻醉药的剂量与注入剂量、观察麻醉情况。 3.专人测定血/尿肌酐 4.颈总动脉插管 5.肾脏结扎线置于肾动脉处，避免勒破肾脏 6.每项生化检验所加入试剂的用量要准确 * * 急性肾功能衰竭 指各种原因在短期内引起肾脏泌尿功能急剧障碍，以致机体内环境出现严重紊乱的病理过程，临床表现有水中毒、氮质血症、高钾血症和代谢性酸中毒等 急性肾功能不全的分类 根据病因学，临床上将急性肾功能不全分为肾前性、肾性、肾后性三种。 急性肾功能的发病机制 肾缺血 肾中毒 血流动力学异常 肾小管损伤 滤过膜受损 皮质缺氧 髓质充血 肾小管阻塞 原尿反漏 滤过系数 外髓部供氧 GRF 少尿 家兔称重、分组---体重相似为一组，并且实验组和对照组体重相同或相似 ↓ 生理盐水作静脉点滴输液---耳缘静脉滴注 ↓ 家兔固定---仰卧位固定 剪去颈部和上腹部毛、麻醉--- 20%氨基甲酸乙酯注射液4ml/kg，耳缘静脉注射麻醉 ↓ ↓ 在麻醉状态下，做颈总动脉插管，并连接到试验系统---取血1mL测血肌酐和在实验系统上读取血压以及记录此时在尿量 ↓ 在麻醉状态下，自耻骨联合上方腹部正中线切开皮肤，切口长4~6cm ↓ 夹闭肾动脉---沿腹白线打开腹腔，将内脏推向左侧，打开后腹膜，暴露肾蒂，分离肾动脉，实验兔和夹闭肾动脉30分钟，对照组肾脏不夹闭。 ↓ 二组家兔耳缘静脉注入庆大霉素4万U/Kg ↓ 每隔10分钟，取一次尿液，测定尿量，并做尿肌酐试验。共取三次。 ↓ 颈总动脉取血，做血肌酐试验 ↓ 最后将家兔一并处死，取出肾脏，观察并比较家兔的肾脏。 - 0.5 - 0.5 血浆或尿液 - - 0.5 - 空白苦味酸 0．250 0．250 - - 血浆或尿液 - 测定空白管R0 - 测定管R 0．25 标准空白管S0 0．25 标准管S 肌酐标准液 试剂（ml） - 1兔 2兔 3兔 4兔 5兔 6兔 组 血压 呼吸 尿量 心率 血肌酐 尿肌酐 内生肌酐清除率 别 （mmHg) （滴/分） （次/分） （ %） （%） （%） 处理前│处理后 处理前│处理后 处理前│处理后 处理前│处理后 处理前│处理后 7兔 8兔 9兔 10兔 11兔 12兔 组 血压 呼吸 尿量 心率 血肌酐 尿肌酐 内生肌酐清除率 别 （mmHg) （滴/分） （次/分） （ %） （%） （%） 处理前│处理后 处理前│处理后 处理前│处理后 处理前│处理后 处理前│处理后 毒素引起的肾小管坏死通常弥散性累及肾小管，而由缺血（如心衰引起的严重低血压）引起的肾小管坏死则成片状受累。 左颈总动脉 迷走神经