细胞培养技术 教学课件 ppt 作者 兰容 周珍辉 主编 章静波 主审 理论部分5特殊细胞培养概要.ppt

第五章 特殊细胞培养概要 　　　干细胞（Stem cell）即起源细胞。在细胞的分化过程中，细胞往往由于高度化分而完全失去了再分裂的能力，最终衰老死亡。机体在发展适应过程中为了弥补这一不足，保留了一部分未分化的原始细胞。 　　　因此，干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。 它们是未分化的，但具有分化成各种特定细胞的能力； 它们可无限地分裂产生大量后裔; 其子细胞有两种命运，保持为干细胞或分化为特定细胞。 全能干细胞 多能干细胞 单能干细胞 胚胎干细胞 ES细胞是一种高度未分化细胞。它具有发育的全能性，能分化出成体动物的所有组织和器官，包括生殖细胞。研究和利用ES细胞是当前生物工程领域的核心问题之一。在未来几年，ES细胞移植和其它先进生物技术的联合应用很可能在移植医学领域引发革命性进步。 成体干细胞 人类干细胞的来源 成人细胞或脐血(骨髓和血)/胎儿组织(专能/多能)。 人工流产后的人类胎儿生殖组织(全能)。 通过体外授精产生的人类胚胎，治疗不育症的夫妇不再需要(全能)。 用捐赠者的配子通过体外授精创造的人类胚胎(全能)。女性供卵要非常慎重。 通过体细胞核转移技术(克隆技术)产生的人类胚胎(全能)。 以上都必须获得当事人的知情同意。 来源于干细胞的组织可能用于治疗的疾病 细胞类型 治疗的疾病 神经细胞 中风、帕金森氏病、老年痴呆症、 脊髓损伤、多发性硬化病 心肌细胞 心脏病发作、充血性心脏病 产生胰岛素的细胞 糖尿病 软骨细胞 骨性关节炎 血细胞 癌症、免疫缺乏症、遗传学血液 病、白血病 肝细胞 肝炎、肝硬化 皮肤细胞 烧伤 骨细胞 骨质疏松症 视网(眼)细胞 黄斑症 骨骼肌细胞 肌肉萎缩症 生命伦理学原则的应用：人类胚胎干细胞研究问题 支持和反对治疗性克隆的论证 人类胚胎的道德地位 胚胎是“人”吗？？ 胚胎是人(person)？胚胎是生命？什么是人？具有特定人类基因组、具有意识能力或潜在的意识能力、处于社会关系中的实体(出生为准)。胚胎是人类生物学生命(human biological life)，但尚未成为人、人类人格生命(human personal life)。 胚胎具有一定价值，应得到一定的尊重(due respect, 如尸体)。没有充分的理由不能操纵和毁掉。有效治疗疾病是一个充分理由。处置它要有一定程序和要求(due procedure)。但不具有与人一样的价值，毁掉胚胎不是“杀人”。然而毁掉要一定程序去做。 应有的尊重和应有的处理程序 应有的尊重指适当的尊重：在完全尊重（人）与不必尊重（如一块孤立的石头）之间：非人动物、胎儿、胚胎、尸体等。 人类胚胎用作研究必须是体外的，不能超过14天； 不用人类胚胎，重要研究的目的就不可能达到； 不是商品，不能买卖； 科学家应采取必要的行动纪念那些胚胎的贡献； 必要的程序是指专门的埋葬或活化，也应有简单庄严的仪式。 动物与人的嵌合问题 人的配子与动物的配子制造嵌合体。目的是什么？为了制造一个能为人干活的“奴隶”吗？后果会如何？出现一个“人头马”怎么办？对人的配子可以任意操纵吗？ 人的体细胞核与动物线粒体DNA的嵌合体 。广州某大学教授用一名7岁的男孩的皮肤体细胞核植入去核兔卵母细胞内，克隆出100多个胚胎。目的是什么？因为人卵难得？为什么不用流产胎儿卵或女尸的卵？这种嵌合体不是人类胚胎，获得的干细胞不是人类干细胞，这种干细胞用于治疗人会发生线粒体病。 造血干细胞 造血干细胞是体内各种血细胞的唯一来源，它主要存在于骨髓、外周血、脐带血中。 造 血干细胞的移植是治疗血液系统疾病、先天性遗传疾病以及多发性转移性肿瘤疾病的最有效方法。 与骨髓移植和外周血干细胞移植相比，脐血干细胞移植的长处在于无来源的限制，对HLA配型要求不高，不易受病毒或肿瘤的污染。 作业 肿瘤细胞具有哪些生物学特性？ 简述肿瘤细胞培养的基本步骤。 什么是干细胞？简述其培养的基本步骤。 胚胎干细胞研究面临的哪些问题及如何解决？ 培养条件： 特殊的培养液：用DMEM培养液，其中胎牛血清的浓度和质量很重要，还要加非必须氨基酸；β-巯基乙醇。 以人或胚鼠的成纤维细胞为饲养细胞。 (3) 必须加入LIF，抑制细胞分化。 干细胞的分化 干细胞诱导分化的常用