简易使用流程.ppt

Leica TCS SP2 Confocal Spectral Microscope ( UV-VIS )雷射掃描共軛焦分光光譜顯微鏡簡易使用流程 (modified by Dr. Chien) 開機流程 : 開機流程 : 開機流程 : 檢視樣品 啟動軟體 Start dialog 啟動軟體之前的注意事項 : 選取 [ Acquire ].. [ Beam ] 參數設定 影像調控 顯示視窗 Timelapse ( T ) / 長時間掃描記錄 在 Mode 選用有 “ T “ 功能的掃描模式才可執行此功能 Time-Series 1/4 Line-Mode ?xt“ Frame-Mode ?xyt“ Stack-Mode ?xyzt“ Time-Series 2/4 Line-Mode ?xt“ Configuration Time-Series 3/4 Stack-Mode ?xyt“ Configuration Time-Series 4/4 Stack-Mode ?xyzt“ Configuration 玻片 : 0.17 mm 浸漬油 : r =1.5180 Beam : L : FITC / TRITC Laser : AOTF 調控約至 70% 處 Objective : PL-APO 63x/1.32 Oil Mode : XYZ Format : 512 x 512 Speed : 400 ( medium ) Scan : Unidriection ( 不用按滑鼠 ) Zoom : 1 ( 原廠起始設定 ) Pinhole : Airy 1 ( 原廠起始設定 ) Average : 8 ( 原廠起始設定 ) PMT 1 / 2 gain : 約為 700 左右 顯示 : Glow ( O ) Overlay 顯示 : RGB Continuous scan 再按一次 Continuous : 停止掃描 如果影像品質及解析可被接受, 請存此影像檔 ( save as ..) 如果訊號太弱, 或有雜訊, 請執行 Average ( 如取 12 張影像作為平均取像 ) 執行 Single ( scan ) 即可取得單一影像. 範例 : 雙重螢光影像擷取 ( FITC / TRITC) FITC TRITC 關機流程 : 首先按下 Scanner 鈕, 開啟掃描器 電源 5 7 8 2 3 4 1 請依序 1 – 7 按序關機 1. 關掉 Ar 雷射, 往左調整 旋鈕轉到原點最小處. 6. 結束軟體 注意 : 當雷射冷卻至少 15 分鐘後 再關掉 [ 8 ] 位置的電源 ( 風扇 ) 關掉顯微鏡燈源 ( 汞燈, 鹵素燈 ), 擦鏡頭, 關掉實驗室總開關 因為樣品的差異性頗高, 所以, 本操作流程 僅是提供一套簡易流程, 供使用人員參考. 然而, 最佳的使用控制調整, 應該以您個人 使用中的樣品為唯一準則. 美嘉儀器 – 共軛焦小組 編製 TEL : 02-2808-1452 / E-mail : confocal@.tw 緊急聯絡 : 0933-267 613 ( 24 hours on-call ) 系統簡介 : 共軛焦掃描器 ( 請參考光路圖 ) 可見光雷射系統 及 電路控制系統 UV 雷射 : 另有獨立的供電開關 雷射電源開關 供電電源開關 防震桌 螢光燈源_汞燈 穿透光燈源 鹵素燈 顯微鏡總電源開關 反射 / 螢光 及 穿透光光源 的切換開關 影像掃描擷取操控旋鈕 ( Control Panel ) Ar/Kr 雷射調整旋鈕 螢光濾鏡轉盤 多光子 螢光影像 感測用的 附加光電 倍增管 PMT 穿透光影像感測 PMT ( Phase contrast, DIC ) 螢光感測用 PMT ( 依組配有 1 – 4 個 Channel ) K-Scanner Z-軸掃描 分光鏡 掃描器冷卻裝置 鏡頭瞳孔照明 之光徑調控鏡 分光菱鏡 UV 光針孔鏡 Pinhole lens Step 1 開機注意事項 : 確定電源為 AC220 V. 確定冷氣空調開啟. UV 雷射電源 可見光雷射 系統電源 Step 2 打開顯微鏡燈源 1. 螢光用汞燈 2. 穿透光用鹵素燈 按下汞燈開關 置於桌下 / Hg 50 W – * 汞燈開關使用間距至少須達 30 分鐘以上 * 汞燈使用壽命一般為 100 小時, 然而, 必須視實際燈管效益而定. 更換時, 請由專人更換調整. 未經許可, 勿擅自動手. 2. 按右邊的顯微鏡總電源開關