血清饥饿处理对人角质形成细胞系.doc

投本刊栏目“研究报道”格式请参照例文如下： 在页面设置中按以下参数设置四周边空： 上：2.5cm，下：1.5cm，左右各2cm 中英文摘要字体为小五号宋体 正文字体为五号宋体 例文： 血清饥饿处理对人角质形成细胞系HaCaT细胞自噬的调控效应研究文题简明扼要，无缩写词，能反映文章内容。 文题简明扼要，无缩写词，能反映文章内容。 陈旭 郭新云 徐松 张孟丽 金慧 邢美春 黄丹 任发亮 杜开和 鞠梅 李新宇 陈崑 周之海 顾恒作者姓名中、英文排序一致，无拼写错误。 作者姓名中、英文排序一致，无拼写错误。 基金项目如有基金资助，请注明，并附基金资助号及证书复印件。 如有基金资助，请注明，并附基金资助号及证书复印件。 作者单位作者单位各项齐全（包括邮政编码、城市、 作者单位各项齐全（包括邮政编码、城市、单位、科室）。 通信作者：鞠梅，Email：jumeiweng@163.com；顾恒，Email： guheng@ 【摘要摘要包括目的、方法、结果、结论，不缺项，未使用缩略语。】 目的 研究血清饥饿处理对人角质形成细胞系HaCaT细胞自噬的调控效应，初步分析其分子机制。 方法 采用血清饥饿处理体外培养的HaCaT细胞诱导自噬，分析血清饥饿对细胞形态和细胞活力（MTT法）的影响。透射电镜观察自噬体囊泡形成，使用Western印迹法进行自噬标志性分子LC3-Ⅰ→LC3Ⅱ转化分析和自噬关键基因Atg7的表达以及MDC染色标记自噬体囊泡。对mTOR的蛋白表达及其ser2448和ser2481位点磷酸化产物水平进行分析。 结果 血清饥饿HaCaT细胞活力上升，电镜观察和MDC染色发现，血清饥饿处理的HaCaT细胞中有自噬体囊泡形成。Western印迹显示，血清饥饿细胞LC3-Ⅰ→LC3Ⅱ转化（LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比率为3.508 ± 0.415）较正常培养的细胞（0.538 ± 0.038）显著上调（两组比较，t = 13.32，P 0.01）；自噬关键基因Atg7表达上调（对照细胞和血清饥饿细胞Atg7/GAPDH分别为0.021 ± 0.006和0.048 ± 0.011，t = 7.27，P 0.05）。血清饥饿处理的细胞中，mTOR的ser2448位点、ser2481位点磷酸化产物水平显著降低（对照细胞和血清饥饿细胞间的磷酸化mTORser2448/mTOR比率分别为0.762 ± 0.108和0.394 ± 0.048，t = 7.58，P 0.05；磷酸化mTORser2481/mTOR的比率分别为0.263 ± 0.039和0.111 ± 0.020，t = 13.77，P 0.01）。 结论 血清饥饿处理可以诱导HaCaT细胞发生自噬，并且导致细胞活力上升。这种自噬的诱导可能与自噬调控关键元件mTOR蛋白活化抑制相关。 摘要包括目的、方法、结果、结论，不缺项，未使用缩略语。 【关键词】 角蛋白细胞； 自噬； 细胞，培养的 Regulatory effect of serum starvation on autophagy in a human keratinocyte cell line HaCaT CHEN Xu*, GUO Xin yun, XU Song, ZHANG Meng-li, JIN Hui, XING Mei-chun, HUANG Dan, REN Fa-liang, DU Kai-he, JU Mei, LI Xin-yu, CHEN Kun, ZHOU Zhi-hai, GU Heng. *Institute of Dermatology, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Nanjing 210042, China Corresponding authors: JU Mei, Email: jumeiweng@163.com; GU Heng, Email: guheng@ 【Abstract】 Objective To evaluate the regulatory effect of serum starvation on autophagy in human HaCaT keratinocytes, and to investigate its molecular mechanism. Methods HaCaT cells were cultured either in Dulbecco′s modified Ea