化学发光与生物发光.ppt

化学发光与生物发光;内容提纲;一、化学发光;2、化学发光的过程;2）化学发光的基本类型;b、间接发光 是指某些化学反应中的由于激发态产物本身不发光或发光十分微弱，但通过加入某种能量接受体（荧光剂）可导致发光。反应式为： A+B → C*+D, F+C* → F*+C, F* → F+hv C为能量给于体，F为能量接受体。 ;一、化学发光;化学发光与其它发光分析的本质区别是体系产生发光 ( 光辐射 ) 所吸收的能量来源不同。体系产生化学发光，必须具有一个产生可检信号的光辐射反应和一个可一次提供导致发光现象足够能量的单独反应步骤的化学反应。;第一类物质是化学发光反应中的的反应物；第二类物质是化学发光反应中的催化剂，增敏剂或抑制剂; 第三类是偶合反应中反应物，催化剂，增敏剂等。;鲁米诺化学发光体系 吖啶酯类化学发光体系 过氧化草酸酯类化学发光体系 无机物化学发光体系 碱性高碘酸钾 酸性高锰酸钾 酸性硫酸铈 稀土配合物(中性) 其他化学发光体系 ;1）、鲁米诺 (luminol)化学发光体系;氧化剂: H2O2 O2 KMnO4 NaClO I2 催化剂: 过氧化酶 氧化血红素 过渡金属离子(Cu2+ 、Mn2+、Co2+、V4+、Fe2+、 Fe3+、 Ni2+、Ag+、Au3+、Hg2+ etc.) ;2）、高碘酸钾（KIO4）发光体系;3）、高锰酸钾（KMnO4）发光体系;4）、铈（Ce）发光体系;3、　化学发光分析仪;IFFM-E型流动注射化学发光分析仪（西安瑞迈分析仪器有限公司）。;图1 柠檬酸三钠–Ce（Ⅳ）-吐温80流动注射化学发光体系流程;;5、化学发光法的应用;b、其他无机化合物的分析;2）有机化合物化学发光分析;b、有机碱;c、氨基酸;d、糖类;e、类固醇类脂;f、药物;3）化学发光在生物领域的应用;二、生物发光;2、生物发光的特点 ;二、生物发光;a、受激荧光;b、发光生物发光;c、化学发光;将化学发光与免疫反应结合起来建立的化学发光免疫测定法。 化学发光标记是继荧光标记，放射性核素标记，酶标记三大标记技术之后，发展起来的最新检测技术。;d、超微弱发光; 萤火虫发光细胞中含有荧光素、荧光素酶两种发光物质。它们与ATP（三磷酸腺苷）及氧一起反应，在氧与荧光素结合时发生电子转移同时发生能量的变化释放出荧光光子而发光。; 　　这类发光过程包括加氧、激发与转移，如海萤的发光：它在自身分开的腺体中分别合成荧光素和荧光素酶，当把两者同时喷进水里时就会在水中反应而发光，波长460纳米，光色为蓝色。 ;鱼类;　　包括刺丝胞亚门和栉水母亚门。这种类型发光具有各种不同的活化反应。亚门和纲不同，活化反应与激发特性也不同。此类发光还可以从一个发光种传递激发态能量给另一个发光种，即有敏化生物发光现象。这种发光可发出不同颜色的光，较多地偏向红色，波长480～490纳米。 ; 栉水母 ;　　它的反应机制与前三种不同。底物在催化循环中会形成还原型核黄素磷酸盐和醛化合物，当遇到荧光素酶和氧时，就会形成一种激发的络合物。络合物断裂时生成氧化核黄素磷酸盐、酸、水及一个光子，波长470～505纳米，光为蓝绿色。;发光细菌; 　　包括海笋属、蚯蚓属及柱头虫属等。这类发光包括两个过程，虫荧光素与氧或过氧化物单独或两者作用后先生成超氧阴离子（自由基），然后再激发。 ;6、其他发光生物; 腰鞭毛虫;右图是一种饥饿的新西兰发光虫，它们从洞穴顶部垂下一根根“渔线”，“渔线”上挂满了分布均匀的粘性发光液滴，当有昆虫经过时，就会被它们捕获。 ;下图显示的是，在新西兰北岛的一个洞穴，大量的发光虫聚集在一起，发出点点蓝色荧光，非常好看。 ;其他发光生物;萤火虫的生物发光画面 ;谢谢!