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第二章/第一节红细胞检查 正常情况下，红细胞生成与破坏保持动态平衡，血液中红细胞数量保持在相对恒定的范围。 血液中红细胞数量可 通过红细胞计数获得 红细胞计数（red blood cell count, RBC） 测定单位体积血液中红细胞的数量 诊断贫血及红细胞增多的指标之一 红细胞计数的方法 显微镜计数法 血液分析仪法 显微镜计数法（重点） 用等渗液稀释血液后，滴入血细胞计数板，计数一定范围内的红细胞，经换算得每升血液中的红细胞数。 检测原理 RBC未排除 白细胞数量影响 10ul末梢血或EDTA抗凝静脉血 加入2ml等渗液中，混匀 混悬液充入改良牛鲍计数板 高倍镜下计数中央大方格的四角及中央五个中方格内的红细胞总数A。 换算？ 操作 RBC/L=（A/5)×25×10×106×200 =(A/100)×1012 Neubauer计数盘 血液分析仪法 采用电阻抗法或激光检测法 方法学评价 方法 优点 缺点 适用范围 显微镜计数法 传统方法，设备简单，廉价 费时费力，精密度低 参考方法；分析仪异常结果复核 血液分析仪法 操作便捷， 易于标准化，精密度高 价贵；环境要求较高 健康人群普查；大批量标本筛检 质量保证（显微镜法） 技术误差 仪器误差 分布误差 显微镜法红细胞计数误差来源有三个 技术误差 参考值 成年男性：（4.09～5.74）×1012/L 成年女性：（3.68～5.13）×1012/L 新生儿：（5.2～6.4）×1012/L 婴儿： （4.0～4.3）×1012/L 儿童： （4.0～4.5）×1012/L RBC存在年龄 与性别的差异 临床意义 RBC＞参考值上限，RBC增多 RBC＜参考值下限，即贫血 生理性变化 病理性变化 生理性增多 生理性缺氧引起 6个月-2岁婴儿 相对性增多：见于呕吐、高热等引起暂时性血液浓缩。通过补液，血容量恢复正常，红细胞增多即消失。 绝对性增多： ①继发性增多，由EPO代偿性或非代偿性增高引起。 ②原发性增多，红细胞系统异常增殖性疾病。 病理性增多 病理性减少（贫血） 生成减少 破坏过多 血管丢失 贫血：红细胞计数、血红蛋白测定或血细胞比容低于参考值下限。 病因学分类 红细胞生成减少 骨髓造血功能减退或衰竭：再生障碍性贫血。 造血物质缺乏或利用障碍：肾性贫血、缺铁性贫血，巨幼细胞性贫血。 细胞内在缺陷（遗传性缺陷） 膜缺陷、酶缺陷、血红蛋白异常致红细胞寿命缩短。 细胞外在异常（获得性因素） 免疫性因素：输血血型不合、新生儿溶血病等。 非免疫性因素：机械损伤、化学物理因素、寄生虫及脾亢等。 红细胞破坏过多 血液丢失：急、慢性失血性贫血 外伤引发的出血 血红蛋白（hemoglobin，Hb ） 在有核红及网织红内合成 是红细胞胞浆内的呼吸载体蛋白 Hb在成熟红细胞内分布特点（近胞膜处多，中心部少）决定了红细胞的双凹圆盘形状 合成速度受促红细胞生成素（EPO）与雄激素调节 Hb （四聚体） 珠蛋白 血红素 2条α链 2条非α链 原卟啉 铁原子 血红蛋白组成 血液中血红蛋白的存在形式 存在形式 所占比例 还原血红蛋白（Fe2+ ） 正常成人99% 氧合血红蛋白 碳氧血红蛋白 硫化血红蛋白 高铁血红蛋白（Fe3+ ） 1% Hb测定即测定血液中各种血红蛋白的总浓度。 血液的物理特性：比重法，折射仪法 Hb的分子组成：全血铁法 Hb与O2可逆性结合：血气分析法 Hb衍生物光谱特点：HiCN，SDS-Hb等 检测原理 HiCN法检测原理 红细胞被溶血剂破坏后，高铁氰化钾可将各种血红蛋白（SHb除外）氧化为高铁血红蛋白（Hi），后者与试剂中的 CN - 结合生成棕红色的氰化高铁血红蛋白（HiCN）。在540nm处测定HiCN的吸光度，直接换算Hb浓度或在标准曲线上查得Hb浓度。 20ul血液加入5ml转化液中，充分溶血转化后，以转化液调零，测定标本（HiCN）在540nm的吸光度A。 计算 操作 直接计算（符合WHO标准的分光光度计） Hb＝ A×64458÷44000×251＝A×367.7 以 HiCN参考液绘制标准曲线，利用吸光度 A在标准曲线上查出Hb浓度 方法学评价 缺点：试剂有毒、高WBC造成试剂混浊 、HbCO 转化慢、不能测SHb。 HiCN测定法（参考方法） 优点：操作简单 ，反应速度快，产物稳定，便于质控。 方法学评价 优点：操作简单 ，试剂无毒，结果准确，重复性好 。 缺点：SDS质量差异大；消光系数未定，不能直接计算Hb浓度；不能