活性氧在大肠癌进展过程中的作用-外科学(普外)专业论文.docxVIP

活性氧在大肠癌进展过程中的作用中文摘要 活性氧在大肠癌进展过程中的作用 中文摘要 (研究背景大肠癌是威胁人类健康的最常见恶性肿瘤之一，但其发生、特别是进 展的机制迄今仍未很好阐明。大肠腔存在大量微生物和食物分解产物，活性氧 (ROS)易于在这种环境下生成，并在高肉类、低纤维素饮食时增加产生。活 性氧的富集可以对大肠粘膜细胞产生损伤作用，与大肠肿瘤的发生有密切关系。 另有研究发现，活性氧水平在大肠恶性肿瘤组织中增加；清除活性氧包括过氧 化氢(H202)可以减少荷结肠癌大鼠肝转移的发生和延长荷瘸动物生存时间， 还可以减少大肠癌术后局部的复发。这些研究提示，活性氧还可能与大肠癌的 进展和预后有关系。但到目前为止，还没有直接的明确的实验依据。T鉴于血管 形成以及癌细胞和血管内皮细胞的相互关系在肿瘤迸展中的重要地位，以及 H202这一常见活性氧分子能促进一些良、恶性细胞表达血管内皮生长因子 (VEGF)这～特性，本研究着重对H202在大肠癌细胞与血管内皮细胞相互关 系中的作用作了探讨，以期从一个侧面来反应活性氧在大肠癌进展中的作用。 【方法采用人结肠癌细胞系Ls．174T及HCT．8及入脐静脉血管内皮细胞系 ＼ ECV一304，建立癌细胞与血管内皮细胞的共培养体系，观察细胞培养基中不同 浓度(10‘9mol／L、10。7mol／L及10‘5mol／L)的H202对癌细胞诱导的内皮 细胞被动迁移的影响。然后，进一步观察外源性H202对结肠癌细胞表达VEGF 的影响，应用RT．PCR、Northern blot、Run—on assay、Western blot、ELISA 及免疫组化等方法检测了癌细胞VEGF mRNA及蛋自质的表达水平和VEGF 基因的转录活性。同时，采用激光细胞扫描仪检测了癌细胞在H202作用下转录 因子NF—Kappa的活性变化。最后，应用荧光分子探针BCECF标记结肠癌细 胞，观察了癌细胞H202暴露后与血管内皮细胞的粘附能力的改变。 结果培养基中10。9mol／L、10’7mol／L及10。5 结果培养基中10。9mol／L、10’7mol／L及10。5 mol／L浓度的H=02作用两种 结肠癌细胞24h后，不同程度地增强癌细胞诱导血管内皮细胞迁移的作用。H202 刺激两种结肠癌细胞系VEGF基因的转录，增加VEGF的表达并在作用24h 后达到高峰，呈现时间和浓度依赖的特性。癌细胞VEGF在核酸及蛋白质水平 上都有提高，同时，癌细胞浆转录因子NF—Kappa增加核内定位。癌细胞暴露 于10。Smol／L H=02 24h后，与血管内皮细胞的粘附作用增强。抑制癌细胞基 、 因转录后可以消除这种增强作用。J 结论外源性H202通过增加结肠癌细胞LS一174T及HCT一8表达VEGF，增强 癌细胞诱导血管内皮细胞迁移。H202有利于结肠癌细胞与血管内皮的粘附作 用。括性氧可能有助于结肠癌的进一步发展。 (意义进一步了解活性氧在结肠癌发生发展中的作用，有助于结肠癌生长及转移 机制的阐明。心 ／ 关键词结肠肿瘤i活性氧i血管内皮生长因子j迁致粘畋基因表达j 2 一． 一． 一．叟堕型暾生塑垡丝墼 —— Effect of Reactive Oxygen Species 011 the Progression of Colon Cancer Backs，ound Colorectal cancer，is one of the most common types of malignant neoplasms in our country with a high mortality rate．The mechanism of genesis and progression of colorectal cancer remains yet to be well elucidated．Several studies have indicated that the ROS including H202 are apt to produce in the lumen of colon and elevated in cancerous colon tissues，and the involvement of ROS in pathogenesis of colon cancer is well known．In addition，evidence from studies showed that removing ROS including H202 delays the occurrence of hepatic metastases and leads to diminished peritoneal recurrence in