药物研发的整体流程讲座-黄从海博士.ppt

目的：观察受试样品一次给予动物后所引起的毒性 反应和死亡情况。 动物： 样品： 方法：剂量选择 给药途径、体积 观察指标 结果：LD50或最大给药量 Note: LD50是半数致死剂量，指在预定时间之内，如96h，导致50%被暴露个体死亡的剂量。常与ED50【半最大效应浓度】配合计算治疗指数LD50/ED50，用以评价药物的安全性，治疗指数大的药物相对安全。 急性毒性试验 目的：观察受试样品连续给予动物后所引起的毒性反应和严重程度， 提供毒性反应的靶器官及损害的可逆性，确定无毒反应剂量。 动物： 样品： 方法：试验分组：对照组、低、中、高剂量 动物数： 给药方法： 检测指标： 一般观察、血液学、血液生化、尿液、系统尸解、组织病理学、心电图（只对犬）、其它； 恢复性观察 资料整理 大鼠、犬长期毒性试验 目 的：观察动物皮肤接触受试物后所产生的刺激 反应情况。 试验材料：动物 受试物 试验方法：用药后不同时间，观察用药部位红斑，水肿情况。 结果判断：表1、2 皮肤刺激试验 根据受试物的化学结构、理化性质及对遗传物质作用终点的不同， 进行微生物回复突变试验、哺乳动物细胞染色体畸变试验、动物微核试验 1、微生物回复突变试验 组胺酸缺陷型鼠伤寒沙门氏菌 样品（溶媒，阳性药） 回变菌落数 哺乳动物肝微粒体酸（S9） 结果判定： （1）受试物诱发的回变菌落数增加，超过对照2倍，有 量效关系。 （2）某测试点超过对照2倍以上，可重复并有统计学意义。 致突变试验 48-72h 2、哺乳动物培养细胞染色体畸变试验 中国仓鼠肺细胞 样品（溶媒，阳性药） 染色体畸变率 S9 结果判定： （1）受试物诱发的染色体畸变数的增加剂量相关。 （2）某一侧试点呈现可重复的，并有统计学意义的增加。 3、啮齿动物微核试验 NIH小鼠—给样品(溶媒、阳性药) 取骨髓、涂片、染色 微核出现频度 结果判定： （1）受试物诱发微核频率的增加与剂量相关。 （2）某一测试点微核增加可呈重复，并有统计学意义的增加 12-72h 选合适选样时间 计数1000个多染红细胞 观察100个中期分裂相 1、一般生殖毒性试验 设计：合笼前给药，♂，60-80d，♀，14d。孕后雌鼠继续给药至多数器官形成期。 观察指标：一般状况，体重、受孕率、死胎数、活胎数及重量。外观及内脏和骨骼变化。 2、致畸敏感期毒性试验 设计：于胚胎器官形成期给药，大鼠孕后6-15d，小鼠 6-15d，兔6-18d，20d处死动物。 计录指标：孕鼠重、黄体数、死胎数、活胎数、活胎重、性别、外观、1/2胎仔作内脏检查，1/2胎仔作骨骼检查。 3、围产期毒性试验 设计：孕中后期开始给药，至产后21d（小鼠），28d（大鼠），31d（兔）。 计录指标：母体及胎仔情况，包括子代生长发育情况。 生殖毒性试验 1、短期致癌试验： 哺乳动物培养细胞恶性转化试验、小鼠肺肿瘤诱发短期试验 2、动物长期致癌试验 ？ 致癌试验 1、身体依赖性试验： 自然戒断试验 替代试验 催促试验 诱导试验 2、精神依赖性试验 ?? 药物依赖性试验 生物学特性——药动学研究 ADME（吸收：absorption、分布：distribution、代谢：metabolism 及排泄excretion ） 方法：及时收集和分析尿液、血液和粪便样品及对动物解剖后的组织和器官。 目的： 药物从各种途径给药后的吸收程度和速度，包括一种推荐为人体给出药的途径 药物在体内的分布速度和药物滞留部位及持续的时间 药物在体内的代谢的速度、初级和次组位点及机理，以及代谢物化学性质和药理学。 药物从体内消除的比例及消除的速率和途径 药物在生物样品中的分离和测定 1、灵敏度 2、特异性 3、重现性 4、标准曲线、回收率 5、待测样品测定 药动学参数测定 1、药时曲线 2、主要参数 静脉注射：t1/2(α)、t1/2