快速检测甜瓜西州蜜17号种子纯度的SSR标记.pdfVIP

新疆农业科学2016，53(3)：407—411 Sciences Agricultural Xinjiang doi：10．6048／j．issn．1001—4330．2016．03．003 快速检测甜瓜西州蜜17号种子纯度的SSR标记 姜陆，卢浩，王贤磊，宁雪飞，李冠 (新疆大学生命科学与技术学院，鸟粤木齐830046) 摘要：【目的】以甜瓜杂交品种西州蜜17号及其母本为材料，运用SSR分子标记技术对杂交种与母本之间 的扩增谱带的多态性进行研究，筛选出一种能够快速检测杂种的SSR标记。【方法】在选取的18个SSR标记 中。SSR标记CMBR068在母本中扩增出一条谱带，在杂种中扩增出两条大小差异较大的谱带，其中一条谱带 的大小与母本扩增的谱带大小一致。【结果】利用2．5％琼脂糖凝胶电泳技术和CMBR068标记对100粒杂交 种子的纯度进行检测，种子纯度的鉴定结果为98％。【结论】西州蜜17号甜瓜杂交种子的纯度，可利用SSR 标记CMBR068，结合2．5％琼脂糖凝胶电泳技术进行快速检测。 关键词：SSR标记；种子纯度；甜瓜 中图分类号：$662 文献标识码：A 文章编号：1001—433012016)03一0407—04 P等【9’建立起鉴定甜瓜种子纯度的DNA 种；Gao 0 引言 指纹数据库的标准体系，并且构建了471个甜瓜 【研究意义】甜瓜西州蜜17号在我国新疆广 品种的QR代码，有利于DNA指纹图谱的阅读和 泛种植，因其口感佳，肉厚多汁而深受欢迎…。 商业应用。但SSR标记在种子纯度鉴定过程中 然而甜瓜的种子纯度对于农民的生产种植尤为重 依赖于聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，耗时长、成本 要，直接影响了甜瓜的品质以及产量。在过去的 高，针对该缺陷，筛选出在杂交后代池和母本池的 十几年里，建立起依赖于DNA分子标记技术的种 扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测多态性高的引 物，用此引物进行杂交后代种子纯度的检测[101。 子纯度鉴定方法，其中由于SSR标记对DNA质 量的要求较低、用量少，能作为共显性标记具有多 【本研究切入点】筛选出多态性较高的分子标记， 态性高等特性而被广泛使用心“J。随着2012年从而降低检测成本，节约检测时间，为实现甜瓜杂 甜瓜测序的完成，大大降低了SSR标记技术在实 交种子纯度在室内快速经济的检测提供依据。 际应用中的难度口J，与传统的形态学鉴定方法相 【拟解决的关键问题】为西州蜜17号大田制种纯 比，SSR标记不易受环境因素影响，能够更高效更 度提供更高效、低成本的重要辅助工具。 准确的对种子纯度作出鉴定∞o。【前人研究进 1材料与方法 展】目前国内外利用分子标记鉴定甜瓜种子纯度 的报道已有许多，李菊芬等。列筛选得到的12对 1．1 材料 SSR特异性引物可用于“东方蜜1号”中混杂的 供试材料为甜瓜西州蜜17号F，代杂交种及 母本自交系杂种的鉴定，且鉴定的结果与大田结 其母本种子；实验室筛选出的18对多态性高的 果一致；Yong等¨1运用了412对微卫星引物构造SSR标记作为引物，引物序列由上海生工有限公 了甜瓜的指纹图谱，并且筛选出一对引物用于鉴 司合成，列出引物名称。表1 别杂交后代种子中由于母本自花授粉产生的杂 收稿日期：2015—11—02 基金项目：国家自然科学基金项目(3126025) 作者简介：姜陆(1992一)，女，新疆人，硕士，研究方向为植物学，(E—mail)762547732@qq．corn 万方数据