海带低分子量岩藻聚糖硫酸酯的制备及其抗血栓活性研究-水产品加工及贮藏专业论文.docxVIP

一㈣Y 一 ㈣Y 1 ㈣9 圳2 哪7 洲8Ⅲ9 Ⅲ7 海带低分子量岩藻聚糖硫酸酯的制备及抗血栓活性的 研究 指导教师签字： 答辩委员会成员签字： IIl ‘ 海带低分子量岩藻聚糖硫酸酯的制备及其抗血栓活性的研究独创 海带低分子量岩藻聚糖硫酸酯的制备及其抗血栓活性的研究 独创 声 明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其 他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得或其他教育机构的学位或证 书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作 了明确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名：董诲71签字日期：b，f年}月J日 ．学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并 向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人 授权学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用 影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国科学技术信息 研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公 众提供信息服务。(保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名：崔镥1 斟耐际害，窝 签字日期：2011年‘月f日 签字日期：知l『年多月1 日 IV 海带低分子量岩藻聚糖硫酸酯的制备及其抗血栓活性的研究海带低分子量岩藻聚糖硫酸酯的制备及其抗血栓活性研究 海带低分子量岩藻聚糖硫酸酯的制备及其抗血栓活性的研究 海带低分子量岩藻聚糖硫酸酯的制备及其抗血栓活性研究 摘要 我国每年心血管疾病死亡者占因病死亡总人数的40．7％。其比例远高于人类 大敌癌症，居各类死因之首，而血栓形成为其主要因素。因此，开发天然、高效、 毒副作用小的抗血栓药物成为当今医药领域研究的重点。 岩藻聚糖硫酸酯是是褐藻中特有的一种含有硫酸酯的水溶性杂聚糖，化学 组成和结构随海藻的种类、生长季节和提取方法的不同而不同。目前对羊栖菜、 泡叶藻、昆布等制备的岩藻聚糖硫酸酯的研究较多，但关于海带中岩藻聚糖硫酸 酯的研究大多为大分子的杂多糖，结构不清楚，无法解释作用机理，所以有必要 对我国海域内生长的海带中的岩藻聚糖硫酸酯进行结构的深入分析，并联系其抗 血栓活性，进行构效关系的研究，本文主要从以下两个方面进行研究： 一、以我国黄海海域生长的海带提取的岩藻聚糖硫酸酯粗糖为原料，用 Q-Sepharose FF阴离子交换分离纯化得到中分子量岩藻聚糖硫酸酯，自由基氧化 降解法得到低分子量的岩藻聚糖硫酸酯，在不同分子量岩藻聚糖硫酸酯的制备和 化学分析过程中，我们对不同制备条件下所得产物的得率、分子量分布、硫酸根 含量、中性糖组成及官能团进行了分析，对测定硫酸根的传统氯化钡一明胶法进 行了改进并将改进后的方法与离子色谱法进行对比，得出一种适合在海带岩藻聚 糖硫酸酯中测定硫酸根含量的最佳方法。具体结果如下： 1)通过Q-Sepharos FF阴离子交换制备得到中分子量岩藻聚糖硫酸酯的重均分 子量和数均分子量为F1：28000和19000，F2-35000和28000。硫酸根含 量为9．52％和19．87％．硫酸根连接在糖的C2或C3位处于平伏键位置。F2硫 酸根含量最高，主要含有岩藻糖和半乳糖。 2) 自由基降解海带岩藻聚糖硫酸酯粗糖时，9％H：0：和4．5％H：0：氧化降解所得的 低分子量岩藻聚糖硫酸酯在300—2500Da内的组分无显著差别，分子量为 1．5kDa，组分集中。4．5％H。0：氧化降解粗糖所得的低分子量岩藻聚糖硫酸酯 V 海带低分子量岩藻聚糖硫酸酯的制备及其抗血栓活性的研究在6000一10000Da之间的组分分布集中，重均和数均分子量分别为7900和 海带低分子量岩藻聚糖硫酸酯的制备及其抗血栓活性的研究 在6000一10000Da之间的组分分布集中，重均和数均分子量分别为7900和 7600。2500-60000a之间的组分得率最高，大于30％，重均和数均分子量分 别为3500和2800，分子量分布比6000-10000Da组分宽。9％H：0：氧化降解粗 糖得到的低分子量糖的硫酸根含量明显低于4．5％的H：0：。在6000-100000a 之间的降解产物得率很少，小于l％。产物主要集中在2500-60000a。4．5％H。0。 氧化降解4．59粗糖所得的低分子量岩藻聚糖硫酸酯在2500-10000Da内的组 分LMWF4硫酸根含量最高，为30．28％。将其用6KDa的超滤膜分离后得到 3．31KDa的LI响／F4a和7．74KDa的LMwF4b，硫酸根含量分别为32．48％和 30．32％。LM阿／F4b主要含有岩藻糖和半乳糖，比例是2：1。LM