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课件:骨髓细胞学检查血细胞的生成与发育.ppt
(一)原理 pH9.6 α-磷酸萘酚 + H2O α-萘酚 + 磷酸 碱性磷酸酶 + 重氮盐 有色沉淀物 (二)方法 (三)正常阳性细胞 在血细胞中除成熟中性粒细胞阳性外,其他细胞基本 呈阴性。 (四)临床评价 1.生理变化: 年龄、应激、妊娠可见增高或降低 2.病理变化: (1).增高 感染、AA、类白血病、急淋、其它 (2).减低 粒缺、脾亢、感染(G-)、病毒、 白血病 五.氯化醋酸AS-D萘酚酯酶染色 ( A S – D C E ) 此酶主要分布在粒细胞和肥大细胞中。通常从原粒 细胞后期即可见有弱阳性反应,而到早幼粒细胞就可 见强阳性反应。且酶的活性不随细胞分化成熟而增 强。此酶的阳性产物比POX更为特异。 单核细胞、淋巴细胞、巨核细胞等均为阴性,所以在临床上将AS-DCE染色作为是粒细胞的标志性酶。 (一)原理 氯化醋酸AS-D萘酚酯酶 氯化醋酸AS-D萘酚 AS-D萘酚 + 醋酸 + 重氮盐 有色沉淀物 (二)方法 (三)阳性细胞 中性粒细胞阳性外,其他血液细胞均为阴性。 (四)临床评价 粒细胞及肥大细胞的标志酶 四.非特异性酯酶 非特异性酯酶是属水解酶,通常可分为中性酯酶(NAE)、酸性酯酶(ANAE)和丁酸酯酶(NBE)。由较多的同工酶所组成,在不同的细胞内存在有不同的同工酶。电泳分析证明人血细胞含有九种酯酶同工酶,如中性粒细胞含同工酶1、2、7、9;单核细胞和血小板含有同工酶4、5。淋巴细胞含有同工酶1和6等。其中同工酶4、5 能被NaF所抑制,所以对染色呈阳性的细胞作NaF抑制试验可鉴别中性粒细胞和单核细胞。 非特异性酯酶检测通常应用于白血病的鉴别诊断,而白血病细胞的高度异型性或异质性使酶活性的表达出现紊乱,所以组合酯酶检测比单一检测更具价值和意义。 在临床上非特异性酯酶一般选用: α-醋酸萘酚酯酶(α- NAE) α-丁酸萘酚酯酶(α– NBE) 醋酸AS-D萘酚酯酶( AS-DAE ) 若将上述任何一个酶与POX或AS-DCE染色于 同一张标本片上,就被称为双酶(双酯)染色。可使粒细胞系和单核细胞系分辨得更清楚。 (一)原理(α-NAE、AS-DAE、α-NBE) α-醋酸萘酚 α-萘酚 + 醋酸 α-醋酸萘酚酯酶 + 重氮盐 有色沉淀物 (二)方法 (三)正常阳性细胞 (四)临床评价 此组合酶类染色,主要运用于各种急性白血病的 鉴别诊断,特别在急非淋(ANLL)中的分型和亚型分 型提供重要依据。 六.铁染色 骨髓铁包括细胞内铁和细胞外铁。细胞内铁为 幼红细胞合成血红蛋白时的利用形式,而细胞 外铁是骨髓以含铁血黄素形式存在的储存铁。骨 髓铁染色可了解骨髓中幼红细胞对铁利用的功能 和铁原料在机体内的吸受与储存情况,若将铁染 色与血清、总铁结合力等检测综合观察,可了解 机体内铁的动态变化。所以铁染色是诊断缺铁性 贫血最重要且较早期的指标之一。 细胞内外的铁与酸性亚铁氰化钾反应形 成蓝色的亚铁氰化铁,定位于含铁的部位。 正常值:细胞外铁--(+)~(++) 细胞内铁—19~44%(Ⅰ--Ⅱ) 意义:1、缺铁性贫血明显降低甚至阴性。 2、铁粒幼细胞贫血明显增多。 3、MDS可见环形铁粒幼细胞增多(15%) 常 见 血 液 病 血 细 胞 特 征 骨 髓 增 生 异 常 综 合 症 本病是一组骨髓造血干细胞克隆性疾病。 外周血象-主要表现在三系呈不同程度的 改变,可见到各类细胞在数量、质量上的异 常。 骨髓象-主要以各系病态造血为突出表现。 分型;(Ⅰ-Ⅴ型) RA;RAS;RAEB;RAEB-t;CMML。 WHO在 1997年11月修订了MDS的分型 难治性贫血:伴有环行铁粒幼
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