课件：溶血性贫血概述.ppt

4. G6PD荧光斑点试验和活性测定 NADPH在紫外线照射下会发出荧光 NADPH的吸收峰在波长340nm处，可通过单位时间生成的NADPH的量来测定G-6-PD活性。 正常人有很强荧光,酶活性为（4.97±1.43）U/gHb G-6-PD缺陷者荧光很弱或无荧光 杂合子或某些G-6-PD变异者则可能有轻到中度荧光 5. PK荧光斑点试验和活性测定 标记荧光于NADH上，此时有荧光的NADH变为无荧光的NAD 正常人PK活性斑点在20钟内消失,酶活性15.1±1.99 U/gHb 荧光斑点不消失或时间延长说明PK活性缺乏 中间缺乏（杂合子）时，荧光25min~60min消失 严重缺乏（纯合子）时，荧光60min不消失。 PEP PK ADP ATP 丙酮酸 LD NADH NAD 乳酸 四. 诊断 有赖于证实酶的缺乏 首先筛选G6PD、PK活性 家系调查有助于诊断 复习思考题 1、用于检查红细胞G6PD酶缺陷的检查 有哪些？ 2、G6PD缺陷症的临床类型有哪些? 后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 资料仅供参考，实际情况实际分析 * * 5. 骨髓检查 排除其他血液系统疾病 了解有无溶血危象存在 6.特殊检查 RBC渗透脆性试验 检测红细胞对不同浓度低渗盐溶液的抵抗力 开始溶血：75.2～82.1mmol/L (4.4～4.8g/L)NaCl溶液 完全溶血：47.9～54.7mmol/L (2.8～3.2g/L)NaCl溶液 等体积的血液加入一系列的低渗NaCl溶液中; 达到平衡; 高速离心并测定光密度. 大多数正常RBC在NaCl浓度约 0.50%时开始结构破坏. 当盐浓度进一步降低 渗漏和溶血增加. Osmotic Fragility 1 2 3 4 5 6 7 8 9 100 80 60 40 20 % Lysis NaCl g/L Sickle Cell Disease ?-Thalassaemia Major Hereditary Spherocytosis Auto-immune HA Normal range 正常渗透脆性 HS时低渗溶液中的 异常溶血 (2)自身溶血试验及其纠正试验 红细胞在37℃孵育48小时，其间由于膜异常引起钠内流倾向明显增加，ATP消耗过多；或糖酵解途径酶缺乏所引起ATP生成不足等原因可导致溶血，称为自身溶血试验。 在孵育时，加入葡萄糖或ATP作为纠正物，观察溶血可否有一定的纠正，称为纠正试验。 正常人红细胞孵育48小时，不加纠正物的溶血率＜3.5%，加葡萄糖的溶血率＜1.0%，加ATP纠正物的溶血率＜0.8%。 本试验不够敏感和特异，仅对遗传性球形红细胞增多症有较大诊断价值，其它多仅为筛选试验 (3)酸化甘油溶血试验(AGLT50） 当甘油存在于低渗溶液氯化钠磷酸缓冲液时，可阻止其中的水快速进入红细胞内，使溶血过程缓慢。但甘油与膜脂质又有亲和性，可使膜脂质减少。当红细胞膜蛋白及膜脂质有缺陷时，它们在pH6.85甘油缓冲液中比正常红细胞溶解速度快，导致红细胞悬液的吸光度降至50%的时间（AGLT50）明显缩短。 正常人AGLT50大于290秒 敏感性高，特异性差，作为家系调查的出筛试验。 遗球时常150秒。 （4）膜蛋白电泳分析 SDS膜缺陷疾病如遗传性球形红细胞增多症有收缩蛋白等含量减低或结构异常 某些血红蛋白病骨架蛋白等可明显异常 四. 诊断及鉴别诊断 （一）诊断 （二）鉴别诊断 自身免疫性溶贫（AIHA） 复习思考题 1、常见的红细胞膜缺陷性溶贫有哪些？ 2、用于检查红细胞膜是否有缺陷的检查有 哪些？ 3、如何诊断遗传性球形细胞增多症？ 酶缺陷性溶贫 一、红细胞葡萄糖6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺陷症 （一）概述 最常见的遗传性红细胞酶缺陷性疾病 发病率：非洲和地中海区域10% 红细胞的氧化性损伤所致 - 药物、 缺氧、 感染、 发热、 酸中毒或食蚕豆. G6PD基因定位于Xq28，伴性不完全显性遗传 男性（XY）缺陷者：血中所有RBC都缺陷 女性（XX）缺陷者： 杂合子—50%RBC缺陷，50%正常 纯合子—100%RBC缺陷 G6PD基因突变形成的变异体的WHO分类 I类：严重酶缺乏，慢性溶贫 II类：严重酶缺乏，间断溶血 III类：中度酶缺乏，药物或感染诱导间断溶血 IV类：酶活性正常，无溶血 V类：酶活性升高，