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PAGE PAGE 8 微生物限度检测原始记录 文件编号R07-028-Ⅱ 产品名称 规 格 产品批号 检验日期 检品来源 报告日期 检验依据 《中国药典》2010年版二部 细菌、霉菌及酵母菌计数 检测室净化工作台编号：SB02-020-02 阳性菌室净化工作台编号：SB02-020-01 pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液（配制批号： ）温度： 湿度： 供试液制备 ： 称取供试品10g（液体10 ml），加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至 100ml，混匀，作为1：10的供试液。取1：10的供试液10ml，加上述缓冲液至100ml，混匀，作为1：100的供试液。 供试品检查： 1〉平皿法：分别取1：10、1：100供试液各1ml，置无菌平皿中，注入15～20ml温度不超过45℃的溶化的营养琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基，混匀，凝固，倒置于培养箱中培养。 阴性对照试验 取试验用的稀释液1ml，置无菌平皿中，注入培养基，凝固，倒置培养。 2〉薄膜过滤法：取相当于每张滤膜含1g供试品的供试液，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液稀释至100ml，混匀，过滤。用 ml pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗滤膜，冲洗后取出滤膜，菌面朝上贴于琼脂培养基平板上培养。 阴性对照试验 取试验用稀释液1ml，照上述薄膜过滤法操作，作为阴性对照。 培养和计数： 细菌30-35℃，培养3天。 培养箱编号：SB02-018-01 设定温度： 培养基配制批号： 培养时间： 月 日 时 月 日 时 霉菌及酵母菌23-28℃，培养5天。 培养箱编号：SB02-019-01设定温度： 培养基配制批号： 培养时间： 月 日 时 月 日 时 观察时间（小时） 1：10 1：100 阴性对照 培养 温度 观察时间 1：10 1：100 阴性对照 培养 温度 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 24小时 24小时 48小时 48小时 72小时 72小时 96小时 96小时 120小时 120小时 平 均 结 果 检验人： 复核人： 微生物限度检测原始记录 文件编号R07-028-Ⅱ 产品名称 规 格 产品批号 检验日期 控制菌检查 ： 大肠埃希菌 大肠埃希菌批号： 营养肉汤培养基配制批号： 胆盐乳糖培养基配制批号： MUG培养基（配制批号： ） 培养箱编号： 培养温度： 实际温度： 供试品的检查 ： 菌悬液的制备：接种大肠埃希菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中或营养琼脂培养基上，培养18-24小时。用0.9%无菌氯化钠溶液10倍递增稀释制成每1ml含菌数为10-100cfu的菌悬液，备用。 阴性对照试验：取稀释液10ml照相应供试品的控制菌检查，作为阴性对照。 阳性对照试验：阳性对照试验方法同供试品的控制菌检查，对照菌加菌量为10-100cfu。 1﹥直接接种法：取1：10的供试液10ml（相当于供试品1g、1ml、10cm2），直接接种至100ml的胆盐乳糖培养基中，培养 小时。 2﹥薄膜过滤法：取相当于每张滤膜含1g供试品的供试液，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液适量，混匀，过滤。用 ml pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗滤膜，冲洗后取出滤膜，接种至100ml的胆盐乳糖培养基中，培养 小时。 取上述培养物0.2ml，接种至含5 ml MUG培养基的试管内，培养，于5小时、24小时在366nm紫外线下观察，同时用未接种的MUG培养基作本底对照，观察结果 。观察后，沿培养管的管壁加入数滴靛基质试液，液面呈 色。 若MUG阴性、靛基质阳性，或MUG阳性、靛基质阴性，取胆盐乳糖培养基的培养物划线接种于曙红亚甲蓝琼脂培养基或麦康凯琼脂培养基的平板上，培养18-24小时，观察结果为 。 检验人： 复核人： 微生物限度检测原始记录