中药制剂质量标准的制定(104页）.ppt

（八）含量测定 1.含量测定项目的选择 （1）药味的选择 原则：首选处方中的主药、贵重药、毒剧药制定含量测定项目。 首选君药，如君药无合适含量测定方法，可依次递选臣药或其它药味。 处方中有贵重药（人参、麝香、熊胆），应找出相应的定量指标。 处方中含有毒剧药（马钱子、生川乌、生草乌、蟾酥、斑蝥），应设两个含量测定。含量太低的应规定含量限度范围。 * （2）测定成分的选择 原则： 测定有效成分 测定毒性成分 测定总成分 有效成分不明确的中药制剂： 测定指标性成分；测定浸出物；以某一物理常数为测定指标 * 测定易损失成分 测定专属性成分：处方中有白芍、赤芍；当归、川芎；黄连、黄柏；枳实、枳壳。一般不选择作为含量测定项，但为君药时应选。如果没有其他可选择也可以选。 测定成分应尽量与中医理论相一致，与药理作用和主治功能一致 另外：中西药复方制剂应有两个含量测定，必须建立西药的含量测定项。当复方制剂含量限度低于万分之一时，应增加浸出物测定或再增加一个含量项。 * 2.含量测定方法的选择 1）含量测定方法：HPLC；GC；TLCS ；UV（比色法）；HPCE；容量法；N测定法；原子吸收；其他（SFE-SFC） 2）新药研究中应用最多的是HPLC、 TLCS 、UV、 GC 3）CP2000版收载情况 （收载含量测定的制剂308个） HPLC 105个，占34% TLCS 56个，占18.2% UV（比色法） 50个，占16.2% * 3.含量测定方法学考察 1）提取条件的选择 A.提取方法的选择 （1）冷浸法（需时较长） （2）热回流（含原粉可用） （3）索氏提取（含原粉可用） （4）超声波处理（举例：双黄连栓，超声20分钟。仲景胃灵丸，超声20分钟。全天麻胶囊，超声30分钟。利咽解毒颗粒，超声20分钟。乳疾灵颗粒，超声20分钟。金水宝，超声20分钟。肿节风，超声10分钟。） * B.根据提取液取舍方法 （1）全量法（索氏） （2）半量法（超声、冷浸、热回流） C.提取条件的选定 提取方法 、溶剂、时间、温度、pH，可采用正交设计优选，也可与经典法对比。 * 2）分离纯化去杂质 纯化目的 ：去除杂质干扰 A. UV（比色法）：样品、对照品吸收曲线基本一致，最大吸收波长在± 2nm以内。 B.TLCS：背景清晰、斑点分离度合格。 C.HPLC：保护柱，使分离度>1.5。 有时不一定要纯化，因制剂已经纯化，如心通口服液；纯化方法可参考鉴别项。 * 3）测定条件的选择 A. UV（比色法）：lmax、显色剂用量、反应时间、温度。 B. TLCS： lS 、lR的选择、薄层板、展开系统、显色剂等。 C. HPLC：检测器（UV、示差、蒸发光散射）、色谱柱（C18）、流动相配比、理论塔板数、分离度、拖尾因子。 D. GC：固定相、涂布浓度、柱温、理论塔板数、分离度、拖尾因子。 * 4）阴性对照：制备阴性对照 A. HPLC：在待测成分保留时间处无色谱峰。 B. TLCS：在待测成分斑点相应位置无斑点。 C. GC：同HPLC D. UV（比色法）：在样品最大吸收处，阴性无吸收或吸收很小（少于5%可以认为无干扰） 。 * 5）线性关系考察（标准曲线） UV（比色法） 目的：确定浓度和吸收度的线性关系和线性范围，确定取样量、利用标准曲线对照计算含量。 提供：操作曲线、回归方程、相关系数（R＞0.999） * HPLC 目的：确定线性关系和范围、确定进样量。提供：工作曲线，回归方程，R在 0.999以上。 TLCS 目的：确定线性关系和范围，直线是否过原点，选用一点法或两点法计算。 提供：操作曲线，回归方程，R在0.995以上。 * 6）稳定性考察 目的：选择最佳测定时间 UV（比色法） 1-2h 稳定性 HPLC 24h 稳定性 TLCS 1-3h 稳定性 GC 12h以上 稳定性 * 7）精密度试验 UV（比色法）：测同一供试品（对照品） 5 次以上 HPLC ：测同一供试品（对照品）5次以上 GC：同HPLC TLCS：同一斑