肝胆疾病的生物化学检验课件.ppt

肝功能检验 二、 肝硬化的生化检验 由于多种损伤因素长期或反复作用于肝，使肝细胞弥漫性变性、坏死以及肝结缔组织弥漫性增生，导致肝广泛的纤维化和结节的形成，称为肝硬化 。 第四节 病例讨论 病例讨论 李XX．男性，49岁。 主诉：乏力、纳差，牙龈和鼻出血6年，腹胀、尿少1年。 现病史：6年来无明显诱因出现消瘦、周身乏力、食欲不振。每逢进食蛋白及脂肪食物后即出现腹胀和大便不成形，每日排便2～3次，但无黏液、脓血和里急后重。常于刷牙时有齿龈出血，鼻出血，稍有碰撞皮肤发青。近 1年来间断出现腹胀，下肢浮肿和少尿，每日约 600～900ml，用利尿药后尿量增加，腹胀减轻，但乏力更明显。近3个月低热、腹痛，腹围渐增大，有时不能平卧。自服利尿药无效而来院诊治。 病例 既往史：10年前因外伤大量输血，7年前体检得知“丙型肝炎抗体阳性”，因肝功能正常而未经特殊治疗。 体格检查：体温38.5℃，脉搏98次/分，呼吸20次/分，血压120/75mmHg。神志清楚，形体消瘦，面色灰暗黝黑，毛发稀疏。眼睑无浮肿，巩膜轻度黄染。颈软，颈静脉无怒张。心肺无异常。蛙形腹，脐膨出，腹壁静脉显露。肝脏触不清，肝颈静脉回流征阴性，脾肋下6 Cm，Ⅱ0硬，移动性浊音阳性。左侧腹部有局限性压痛，轻度肌紧张和反跳痛，下腹部轻度叩痛，肠鸣音无亢进及减弱。可见肝掌，胫前有色素沉着。 病例 腹水检查：淡黄色，比重 1.018，蛋白 25g／L，李凡他试验阳性，细胞总数600 × 106/L，N 0.80，L 0.20 问题1：根据以上特点，应考虑什么疾病？ 问题2：有哪些辅助检查对该患者的诊断有帮助？ 计算： 参考范围：男性 11～50U/L （37℃），女性 7～32U/L（37℃） ` 方法评价: 本法准确度好；精密度好线性范围宽（460U/L）；操作 简便；但对试剂纯度要求高 二、γ-谷氨酰转肽酶测定的意义 分布：肾最高，其次是前列腺、胰、肝等器官 尿中GGT活性： 可能有助于诊断肾疾病 血清GGT用于诊断肝胆疾病 1. 原发性或转移性肝癌 2. 阻塞性黄疸 3. 病毒性肝炎和肝硬化 4. 乙醇性肝炎 五 血清胆红素测定 一、测定方法简介 总胆红素 未结合胆红素 结合胆红素 δ胆红素 （共价结合白蛋白） 重氮法 改良J-G法 胆红素氧化酶（bilirubin oxidase，BOD）法 测定方法: （一）重氮法 结合胆红素能与重氮试剂直接反应生成紫红色的偶氮化合物（λ=560nm） 未结合胆红素需加入甲醇、乙醇、苯甲酸钠、尿素等“加速剂”，破坏分子内氢键，才能与重氮试剂反应生成紫红色的偶氮化合物 结合胆红素 + 原理： 血清与醋酸钠-咖啡因-苯甲酸钠试剂（咖啡因试剂）混合后，加入氯化重氮苯磺酸（重氮试剂），生成紫红色偶氮胆红素，最后加入强碱性酒石酸钠溶液，使颜色不稳定的紫红色偶氮胆红素在咖啡因存在下转化为稳定的蓝色偶氮胆红素。反应结束后，在600nm波长比色，从校准曲线查找总胆红素和结合胆红素含量 醋酸钠缓冲液保持偶氮反应的pH； 咖啡因试剂促进未结合胆红素分子内的氢键破坏，加速与重氮试剂的偶联反应； 叠氮钠（或抗坏血酸）可终止结合胆红素的偶氮反应。 （二）改良J-G法(加速剂为苯甲酸钠-咖啡因) 原理： 方法评价： 灵敏度高 抗干扰能力强 线性范围可达342μmol/L 正常参考浓度时精密度较差胆红素浓度达342μmol/L时， 精密度好 （三）胆红素氧化酶法 胆红素在450nm波长处，吸光度的下降与浓度成正比。 pH8.0时，胆红素氧化酶可催化结合胆红素和未结合胆红素氧化； pH4.5时，胆红素氧化酶仅催化结合胆红素氧化。 灵敏度高，干扰少，准确度好，线性范围宽 十二烷基硫酸钠（SDS）及胆酸钠等阴离子表面活性剂可促进其氧化 原理： 方法评价： 二、血清胆红素测定的意义 诊断黄疸及判断黄疸程度： 总胆红素17.1～34.0μmol/L为隐性黄疸 ＞34μmol/L时，皮肤、粘膜、巩膜出现黄染，称临床黄疸 鉴别黄疸类型： ①溶血性黄疸 ②肝细胞性黄疸 ③阻塞性黄疸 疾病的诊断 肝炎 肝癌 胆道部分阻塞 再生障碍性贫血↓ 慢性肾炎↓ 黄疸类型的鉴别 六 血氨测定 一步法，也叫直接测定即不需从全血中分离出氨即可直接测定 两步法，即先从全血中分离出氨,而后再进行测定； 微量扩散法、离子交换法 酶法和氨电极法 原理： 血浆中的氨在足量α-酮戊二酸和NADPH存在时，经谷氨酸 脱氢酶