实验动物学基本技术操作.ppt

Basicoperatingtechniquesforanimalexperiments ; 这些规范和操作对动物实验室条件、工作人员素质、技术水平和操作方法都要求标准化，包括动物实验过程中消毒剂选择、消毒方法、动物实验前准备、动物实验技术操作、样品采集等各个环节。 ; 动物实验操作是畜牧兽医学科研究生必须熟练掌握的基本功。 由于研究目的不同，动物实验的操作技术方法多种多样，但其基本操作技术方法是一样的。;内 容 提 要;一、实验动物的分组与编号;（一）实验动物性别的鉴定;（二）实验动物编号和标记方法; 染色法是用化学剂在动物身体明显部位如被毛、四肢等处进行涂染，或用不同颜色等来区别各组动物，是实验室最常用、最容易掌握的方法。 常用的标记溶液有： ① 3％ ~ 5％苦味酸溶液（黄色）； ② 0.5％中性红或品红溶液（红色）； ③ 2％硝酸银溶液 (咖啡色，涂后需光照10min)； ④ 煤焦油酒精溶液（黑色）； ⑤ 龙胆紫溶液（紫色）。;1、染色法(Staining);小鼠的染色标记方法 ; 若动物编号超过10或更大数字时，可使用上述两种不同颜色的溶液，即把一种颜色作为个位数，另一种颜色作为十位数。这种交互使用可编到99号。(如红色为十位，黄色为个位)。; 挂牌法可用来标记多种动物，一般用于兔、豚鼠标记。犬、猴、猫等动物有时可挂在颈部或笼箱或链条上。 使用自制的或购买的烙压有编号的圆形或方形牌（铝、不锈钢或者塑胶等材料），或将号码按实验分组编号烙在动物颈圈皮带上，将其固定在动物颈部。也可挂在实验动物的耳部、肢体或笼具上。 ;3、耳号法;用7号或8号注射针头蘸取少量碳素墨水，在动物唇的内侧、耳部、前后肢以及尾部等少毛部位进行纹身，刺出相应数字。用黑墨涂在打号局部，数天后黑墨浸入皮下，显示出蓝黑色字号。 该法适用于大小鼠、豚鼠等。在实验动物数量少的情况下，也可用于兔、狗等动物。 目前有市售的兔用打号器，原理与此相同，附带有不同数字和符号的针刺字号。;5、剪毛法;7、烙印法;8、电子标识;根据不同用途，动物电子标识可封装成注射植入型、耳挂型、留胃型和脚环型等多种形式。 ;;二、实验动物的抓取与固定;小鼠的抓取;小鼠的固定方法; 抓取方法基本同小鼠，但最好戴防护手套。; 大鼠的尾静脉采血和手术操作需固定大鼠。 麻醉后置于大鼠实验板上(仰卧位)，先用线固定好四肢，然后用棉线将大鼠两上门齿固定于实验板上。 如做大鼠尾静脉注射，可将大鼠置于固定器内，使鼠尾留在外面进行操作。 ;豚鼠的抓取与固定;家兔的抓取;兔头固定;台式固定; 5、犬(dog)的抓取与固定 经过驯服的犬抓取是很方便的，而未经驯服的犬抓取时，要用特制的钳式长柄犬夹夹住颈部，使犬头向上，颈部拉直，再套上犬链。 急性实验用犬，可用犬夹夹住犬颈部后,将它压倒在地，由助手将其四肢固定好。 ;犬嘴的捆绑方法;狗的头部固定器 ;手术台固定; 抓取猪时，一人从背后紧抓猪的两耳将其提起，使其臀部着地，两腿膝部合拢将其躯干夹住。 ;三角架固定;马的六柱栏保定 ;提拉前肢倒牛法 ;旋转式尾栏挤压笼 ;三、实验动物的被毛去除技术;三、实验动物的被毛去除技术;四、实验动物给药技术;（一）经口给药;胃内灌注法(stomach perfusion) ;小鼠灌胃方法 ;实验动物种类;（二）注射 (injection);（二）注射 (injection);（二）注射;（二）注射 (injection);（二）注射 (injection);用透明玻璃塑料容器扣住大鼠或小鼠，置于试验台边缘，使尾巴外露。 用75%酒精棉球反复擦拭尾部，或于50°C左右温水中浸泡鼠尾几分钟，使尾静脉血管扩张。然后，左手拇指和食指捏住尾部两侧，使静脉更为充盈，中指从下面托起尾巴，以无名指夹住尾梢；右手持注射器（4号针头）与尾平行，从尾巴下1/4处刺入。若注射器回抽见血，推进时无阻力，且无白色皮丘出现，说明针头已刺入血管，即可缓慢注入药液。 注射量：一般为0.5ml为宜。 ;如出现尾部发白、皮下出血或肿胀，同时注射阻力增大，则应立即停止注射，按次序向尾根部移动，重新选择血管位置进行注射。 注射完毕马上拔出针头，用干棉球压迫止血。 注射前应确认针头针筒内无气泡 注意：操作术式？ ;将兔置固定盒内或由助手固定好动物，操作者将注射部位的毛拔去并用酒精棉轻轻擦拭耳部外缘，静脉即明显可见。先由耳尖部静脉注射，若失败，再逐步向耳根移动重新注射。 注射完毕抽出