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2.Giemsa染色法 (1)染色原理:与Wright染色法基本相同。Giemsa染色法加强了天青的作用,提高了噻嗪类染料的效果。 (2)试剂:染液放置越久,其染色效果越好。 (3)染色:Giemsa染色法的步骤与方法见表1-11-2。 3.Wright-Giemsa染色法 Wright-Giemsa染色法结合了Wright染色法和Giemsa染色法的优点。在Wright染液配方的基础上,每1.0g Wright染料添加0.3g Giemsa染料。染色步骤与Wright染色法相同。 【方法学评价】血涂片染色的方法学评价见表1-12。 【质量保证】染色过深、过浅与血涂片中细胞数量、血膜厚度、染色时间、染液浓度、pH密切相关。Wright染色的质量保证见表1-13。血涂片染色不佳的原因及纠正措施见表1-14。 需要注意的是,标本拒收不但造成检验费用增高和时间浪费,还可能延误诊治甚至危害患者。因此,涉及血液标本采集的所有工作人员,都必须在标本采集、转运和处理各个环节进行全面而规范的培训。 (四)血液标本保存 血液标本保存应当在规定的时间内、确保标本特性稳定的条件下,按要求分为室温保存、冷藏保存、冷冻保存(表1-3-3)。 (五)检测后血液标本的处理 根据《实验室生物安全通用要求》要求: ①将操作、收集、运输及处理废弃物的危险减至最小。 ②将其对环境的有害作用减至最小。 第二节 血液标本采集的质量保证 标本采集是检测前质量管理的主要内容,检测前的大部分工作是由患者、医生、护士、运送人员及检验人员在实验室以外的空间和进入检验过程前完成的,临床实验室难以监控这一过程中的每个环节。 一、血液标本采集环境要求与生物安全 (一)环境要求 应该人性化设置,空间宽敞,光线明亮,通风良好,血液标本采集的台面高低和宽度适宜,座位舒适。 (二)生物安全 1.防止交叉感染 2.环境消毒 二、血液标本采集的过程要求 (一)检验申请单 检验申请单或电子申请表中应包括患者最基本的信息,以识别患者和经授权的申请者,同时应提供相关的临床信息。相关的临床信息至少包括姓名、性别、年龄,以用于解读检验结果。 (二)标本采集和处理的具体要求 实验室应向负责采集标本的人员提供标本采集和处理的具体要求(表1-4)。 (三)标本信息完整性与接收 血液标本可通过检验申请单溯源到特定的个体,实验室不应接收或处理缺少标识的检验申请单和标本(表1-4-1)。 三、血液标本采集及检测结果的影响因素 (一)饮食和生理状态 患者饮食和生理状态对检验结果的影响见表1-5。 (二)药物 药物干扰检验结果主要有4条途径: ①影响待测成分的物理性质。 ②参与检验过程的化学反应。 ③影响机体组织器官生理功能和(或)细胞活动中的物质代谢。 ④对机体器官的药理活性和毒性作用。 (三)采血操作 1.采血时间 2.采血部位 3.采血时体位 4.压脉带的使用 (四)其他 1.输液。 2.溶血(表1-6) 3.某些抗凝剂对标本的影响 4.低温保存对标本的影响 * 假设HCT为0.50 第三节 血涂片制备与染色 外周血涂片检查是最有益的血液系统疾病检查手段,能为临床提供大量的信息。 因此,血涂片制备和染色的质量直接影响血细胞形态的检验结果。 一张合格的血涂片应该是厚薄适宜,血膜头、体、尾分明,分布均匀,两侧留有一定的空隙,边缘整齐。 一、血涂片制备 (一)载玻片要求 制备血涂片使用的载玻片要有很好的清洁度。 新载玻片常有游离碱质,应用铬酸清洗液或10%盐酸浸泡24h,然后再彻底清洗。 已用过的载玻片可在含有适量肥皂水或合成洗涤剂的水中煮沸20min,用热水将肥皂和血膜洗去,再用自来水反复冲洗,擦干或烤干后备用。 (二)血涂片制备方法 1.手工推片法 (1)薄血膜推片法(表1-4-2):临床常用的方法,主要用于观察血细胞形态及仪器法检测结果异常的复查。
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