G98310045六页稿-东海大学化学工程与材料工程学系.DOC

PAGE \* MERGEFORMAT 1 培養基添加物對靈芝菌絲體活性成分生成之影響 研究生：方瑋 指導老師：楊芳鏘 摘要--本研究主要目的在探討食用水果果皮添加於靈芝的液態培養與固態培養的可能性，及生理活性成份生成之影響，尋找最佳果皮種類與及最適添加量，同時，進行階段性培養以及添加萃取劑不同，尋找最適培養條件。在液態培養方面，以添加2ml柳丁水萃液培養十三天之菌重與多醣分別為10.67 g/L與1.50 g/L，而相對於控制組之菌重與多醣分別為5.77 g/L與0.52 g/L，添加效果增加兩倍。研究發現果皮水萃液添加對靈芝酸生成並無太大幫助；果皮利用95%乙醇萃取，於第4天添加的乙醇萃取物10ml培養十六天，則靈芝酸含量為46.27mg/g D.W.，總多酚與類黃酮含量分別為78.59與7.58mg/g D.W.，則相較於控制組靈芝酸含量達九倍、總多酚與類黃酮則分別達到十倍與四倍。在固態培養方面，利用廢棄果皮乾燥後磨成粉末，果皮添加於大薏仁的固態培養基，發現以添加葡萄柚粉末培養三十六天之固態培養對靈芝酸含量為17.29mg/g substrate，而未添加之固態基質對靈芝酸含量為9.61mg/g substrate.，相較下添加果皮粉末其效果為控制組之兩倍。研究結果証實果皮萃取物或果皮添加可以有效提高靈芝生理活性成份。 關鍵字：靈芝、柑橘類果皮、Ganoderma lucidum acid 一、緒論 1-1 前言 靈芝(Ganoderma lucidum)為珍貴的食藥用真菌，其主要原因是靈芝含有多種具有生物活性與療效的物質，如多醣體、三萜類、超氧歧化酶、生物鹼以及蛋白質等。近幾年，人們開始注重果皮廢棄物是否具有有效成分可被利用；酚類化合物為植物化學成分中最大族群，而酚類化合物中則又以類黃酮占最多；由於日前柑橘類果皮已被證實具有抗癌成分(王，2008)。得以發展出廢棄物果皮亦可回收再利用，使水果可發揮其最大效用。 1-2 研究動機 柑橘類果皮為食用後則丟棄的廢棄物，日前柑橘類果皮已被證實由於柑橘類果皮萃取的5-OH-HxMF以及其他PMFs，具有多種生物活性，抗癌性、抗發炎效應，抗腫瘤活性；PMFs又容易被人體吸收進入血液循環系統，故柑橘類果汁已成為極重要的防癌劑之一。且從柑橘類果皮中找到抗癌成分，其含量比果肉多，可由此思考平時食用廢棄的果皮可回收再利用(王，2008)。本研究以柑橘類果皮做為誘導劑，進行靈芝固、液態發酵培養，探討是否能促使靈芝之生理活性(藥理特性)含量提升。 二、文獻回顧 2-1 靈芝生理活性與藥理效果 靈芝含有多種具有生物活性與療效的物質，主要有多醣體(Polysaccharide)、三帖類(Triterpenoids)、超氧歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)、蛋白多醣(Proteoglycan)、靈芝多醣幾丁質 (SACCHACHITIN)等。其中靈芝多醣體被認為是抗癌活性的主要成份，且必須具有即必須具有C-6側枝，(1-3)-β-D-glucopyranosyl-(1-3)-A-D -glucopyranosyl之結構，才有抗癌的效果；如有Polyol基接(1→3)之連接體架之結構則可增加抗癌的效果 (王等人，1998)。而三萜類則具有抗氧化、清除自由基、降血壓等功能。另外靈芝多醣幾丁質(SACCHACHITIN)則在皮膚癒傷、抑制tyrosinase以及黑色素細胞之黑色素產生方面具有功效。 2-2柑橘類果皮介紹 2-2-1果膠物質 由植物、水果、或果皮中萃取出的多醣類物質；大致可分為果膠原質、果膠酯酸、果膠酸，而水果中的果膠則為果膠原質，為非水溶性。由於果皮中含有較高的果膠物質，可在人體內能黏附重金屬離子，清除體內毒素及促進小腸蠕動，降低血清膽固醇含量。(Rouseff and Nagy ,1994) 2-2-2精油 除了具有芳香療法之外，精油中主要成分為檸檬烯(Limonene)具有預防癌症，抑制癌細胞蔓延，包括紫外線引起的皮膚癌及乳癌。 2-2-3類黃酮 又為維生素P，含在柑橘果皮中，對人體主要機能包括抗氧化、抗癌、抗發炎及降低血管疾病的功能。 2-2-4配醣體 碳水化合物之一種，其組成是單醣或寡糖的半縮醛羥基與另一分子中的羥基、氨基或硫羥基等失水而產生水合物。一個配醣體可分為兩部分，一是糖的殘基(糖去掉半縮醛羥基)，另一是配基(非糖部分)。具有有鎮咳、利尿、防腐、消炎等作用，也是知名的「阿斯匹林」的來源。 三、材料與方法 3-1 實驗菌株 本實驗所採用之菌株為靈芝屬之赤靈芝Ganoderma lucidum (BCRC36123)，係購自新竹食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心，菌株以生物資源中心所建議之PDA做為斜面培養基，接菌完畢後於30℃培養箱