生物素标记核酸探针分子杂交.PDF

维普资讯 vo16 N0．1 第B卷第 1期 病 毒 学 杂 志 ． l鲫1年 3月 VIROLOGICA SIN ICA Mar．1帅 1 生物素标记核酸探针的分子杂交 技术及其应用 曹先维 张鹤龄 (内蒙古大学生物系．呼和浩特 010021) TheTechniqueofMolecularHybridizationwithBiotin LabelledNucleicAcid Probeand itsApplications Cao Xian—wei Zhang He—ling (BiologyDepartment，InnerMongoliaUniversity．H~hkot010021) 关■饲 ：生物素标记的核酸撵针 分子杂变 核酸斑点杂交 Key words：Biotin labelled nucleleacid probe MolecularBybridization Nucleicacidsspothybridization(NASH) 核酸分子杂交是基于核酸链问互补碱基对的特异性结合，测定核酸碱基顺序同源性 的一种现代技术，是基因工程、分子遗传及医学诊断中常用的方法。该法较常规诊断法 灵敏度高、特异性强， 目前，已广泛应用于重组 DNA的筛选、基因分析、染色体基因 定位及病毒病诊断等方面。 目前，用于分子杂交的 eDNA探针，普遍采用同位素标记，放射 自显影方法检测。 然而 由于放射性同位素存在半衰期短，致使探针寿命短，价格昂贵，实验周期长，而且 对人体有一定危害等缺点，由此限制了放射性探针的广泛应用。因此，长期以来，研究 人员又一直致力于非放射性标记接酸探针的研究。八十年代 初发展起来的生物素 亲‘和 素系统用于核酸探针的标记、杂交及检测技术，就是这方面的一大进展。本文试图就生 物素一亲和素系统用于核酸探针的标记、分子杂交及检测技术的进展，其优点及应用等 方面作一综述。 一 、 生栩素一亲和素系统简介 生物素 (Biotin)是一种B族维生素，广泛分布于天然食物 (如花生、西红柿等 ) 中，分-T-t244．31道尔顿，分子中含有脲基环和戊酸侧链 (结构式如图 1)。生物素与 抗生物素蛋 白一亲和素 (Avidin)具有很强的结合作用。亲和素是一种糖蛋白，存在于 禽蛋，多种鸟的输卵管和蛙舜胶冻中。分-Tt67，000遭尔顿，等 电点10．5。每个分子 由 四个相同亚基组成，每个亚基都能专一性地 结合一个生物素分子，这种 结合作用很强 ＼ 维普资讯 2 病 毒 学 杂 志 第 6卷 O ll ／ ＼ HN NH 0