第十一章 抗生类药物分析 Chapter 11 The Analysis of Antibi.pptVIP

抗生素在质量控制上的特殊性.生产的特殊性 性质的特殊性(稳定性差)  质 量问题 化学纯度低, 三多:同系物多(G),异构体多(P),降解物多(T) 抗生素理化测定法与微生物测定法的关系.  微生物测定法:用抗生素对微生物的杀伤和抑制程度为指标来衡量抗生素的效价(potency). 原理: 对数剂量和反应成直线,用管碟琼脂扩散法.  特点  理化测定法:根据抗生素的结构特点, 利用其特有的化学或物理化学性质及反应而建立的方法. 特点 streptidine streptose N-methyl-L-glucosamine streptobiosamine Characteristics 链霉素的构成为一分子链霉胍和一分子链霉双糖胺结合而成的碱性甙。 链霉素分子中有三个碱性中心，可与无机酸或有机酸形成可溶于水的盐，临床上多用其硫酸盐。 Properties 酸性条件下，链霉素水解为链霉胍与链霉双糖胺，进一步水解则得到N-甲基-L-葡萄糖胺。弱碱性条件下能使之水解为链霉胍及链霉双糖胺，但继之即将链霉糖部分分子重排为麦芽酚(maltol),这一性质为链霉素所特有，可用于鉴别。 Identification Tests Ninhydrin reaction Elson-Morgan reaction 链霉素经水解，产生N-甲基葡萄糖胺，在碱性溶液中与乙酰丙酮缩和成吡咯衍生物，与对二甲氨基苯甲醛的酸性溶液反应即生成红色缩合物。 Maltol reaction 链霉素在碱性溶液中，链霉糖经分子重排使环扩大形成六元环，然后消除N-甲基葡萄糖胺，再消除链霉胍生成麦芽酚(α-甲基-β-羟基-γ-吡喃酮)。麦芽酚可与铁离子在微酸性环境中形成紫红色配位化合物。 Sakaguchi reactoin 本品水溶液加氢氧化钠试液，水解生成链霉胍。 链霉素B杂质检查 BP（1993）规定了链霉素B的检查项目。甘露糖链霉素称作链霉素B，它是链霉素分子中N-甲基葡萄糖胺的C4〞位上的羟基连接一个D-甘露糖组成的。 含量测定Assay 目前各国药典仍采用微生物检测法。 茚三酮反应Ninhydrin reaction ＋ 2 ＋ ＋3H2O H+ Fe3+ H2O NaOH Maltol reaction Maltol 庆大霉素(Gentamycin) Structure and Characteristics Structure Characteristics 庆大霉素是由绛红糖胺、脱氧链霉胺和加洛糖胺缩和而成的甙。 庆大霉素有五个碱性中心，其碱性相似。能与无机酸或有机酸形成可溶于水的盐，多用硫酸盐。 Property 硫酸庆大霉素水中易溶，在乙醇、丙酮、氯仿 或乙醚中不溶。对光、热、空气均较稳定，水溶液 稳定，pH2~12时，100℃加热30min活性无明显变 化。 庆大霉素在紫外无吸收。 purpurosamine deoxystreptosamine garosamine Structure 鉴别反应Identification 茚三酮反应 Ninhydrin reaction 本品与链霉素一样具有氨基糖甙类结构，羟基胺类和α-氨基酸的性质，可与茚三酮生成蓝紫色缩和物。 Elson-Morgan reaction 与链霉素一样，经水解后也产生N-甲基葡萄糖胺(加洛糖胺)在碱性溶液中与乙酰丙酮缩和成吡咯衍生物，与对二甲基苯甲醛的酸性醇溶液反应，生成红色缩和物。 紫外分光光度法Ultraviolet spectroscopy 庆大霉素分子中无共轭双键系统，故在紫外区无吸收。 薄层色谱法TLC 高效液相色谱法HPLC 红外光谱法IR 硫酸盐反应Sulfate reaction 检查－庆大霉素C组分测定 庆大霉素C1、C2、C1a对微生物的活性无明显差异，但其毒副作用和耐药性有差异，导致各组分的多少影响产品的效价