水产动物营养与饲料实验课件.ppt

序号 木糖标准液 1mg/ml(ml) 双蒸水 (ml) DNS (ml) 对应木糖含量 （μg） 0 0 2.0 3.0 0 1 0.2 1.8 200 2 0.4 1.6 400 3 0.6 1.4 600 4 0.8 1.2 800 5 1.0 1.0 1000 木聚糖酶活力的测定（DNS法） 2.酶活力测定 在试验管加入1.8ml底物，50℃水浴中预热5min后，加入200μl适当稀释的酶液（使OD值在0.1-0.7之间），混匀。精确反应5min后迅速冷却（置于冰浴中），加入3.0ml DNS试剂，混匀。沸水浴5min取出试管，加入10ml蒸馏水，冷却至室温，然后在540nm处测定样品中的木糖含量； 木聚糖酶活力的测定（DNS法） 按照下式计算样品的木聚糖酶的活力： 木聚糖酶活力的测定（DNS法） U――――木聚糖酶活力，u/g　； X――――根据吸光度在标准曲线上查得（或从回归方程计算出）的还原糖生成量，μg； V――――样品提取时加入水的量（ml）； N――――样品二次稀释时的稀释倍数； 0.2―――参与反应的酶量（ml）； W――――样品重量（g）； 5――――反应时间（min）。 注：每个样品同时做的三支平行试管，其相对误差=±10%，超过此范围，试验应重做。 式中： 木聚糖酶活力的测定（DNS法） 四、仪器和设备 1、分析天平 6、玻璃漏斗 2、高温炉 7、定量滤纸 3、坩锅 8、移液管 4、容量瓶 9、烧杯 5、滴定管 饲料中Ca含量的测定 1、 试样的分解 2、 试样的测定 3 、用滤纸过滤 五、测定步骤 饲料中Ca含量的测定 干法：称取试样2 g于坩埚中，在电炉上小心炭化， 再放入高温炉于550℃下灼烧3小时。在盛灰坩埚 中加入盐酸溶液10 ml和浓硝酸数滴，小心煮沸。 将此溶液转入100 ml容量瓶，冷却至室温，用蒸 馏水稀释至刻度，摇匀为试样分解液。 1、试样的分解 饲料中Ca含量的测定 2、试样的沉淀 a 准确取试样分解液10ml于烧杯中，加蒸馏水100 ml，甲基红指示剂2滴。 b 滴家氨水溶液使溶液呈橙色，再加盐酸溶液使溶液恰变成红色（pH为2.5-3.0）小心著沸，漫漫滴加热草酸氨溶液10 ml，并不断搅拌。 C 如溶液变橙色，应补滴盐酸溶液至红色。煮沸数分钟，放置过夜使沉淀陈化。 饲料中Ca含量的测定 1：50氨水溶液洗沉淀6-8次，至无草酸根离子（接滤液数毫升，加硫酸液数滴，加热至30℃，再加高锰酸钾溶液2滴，呈微红色，30秒不褪色）。 将沉淀和滤纸转入原烧杯中，加入硫酸溶液10 ml,蒸馏水50 ml，加热至75—85℃，用0.05 mol/l高锰酸钾标准溶液滴定，溶液呈粉红色半分钟不褪色为终点。 3.试样的过滤 饲料中Ca含量的测定 （V-V0）×C×40/2 六、结果计算  式中：V—— 0.05 mol/l高锰酸钾标准溶液滴定用体积（ml） V0—— 测定空白时，0.05 mol/l高锰酸钾标准溶液滴定用体积（ml） C—— 高锰酸钾标准溶液浓度（mol/l） M—— 试样质量（g） V/—— 滴定时移取试样分解液体积（ml） 40/2—— 钙的mol数 M×V//100 Ca（%）= ×100/1000= （V-V0）×C×200 M×V/ 饲料中Ca含量的测定 每个试样平行样进行测定，以其算术平均值为结果。 含钙量在5%以上，允许相对偏差3%； 含钙量5%—1%时，允许相对偏差5%； 含钙量1%以下时，允许相对偏差10%。 重复性 饲料中Ca含量的测定 饲料中总磷量的测定 本标准规定了用钼黄显色光度法测定饲料 中总P量的方法. 本标准适用于配合饲料，浓缩饲料，预混 合饲料和单一饲料. 一、主题内容与适用范围 将试样中的有机物破坏、使P游离出来，在酸性溶液中，用钼酸铵处理，生成黄色的(NH4)3PO4NH4VO3·16M0O3,在波长420nm下进行比色测定。 二、原理 饲料中总磷量的测定 1、HCl 1:3 2 HNO3 3、钒钼酸铵显色剂 三、试剂 饲料中总磷量的测定 四、仪器和设备 1、粉碎机 2、分样筛 3、分析天平 4、分光光度计 5、比色管 饲料中总磷量的测定 五、测定 1、标准曲线的制作 在50ml比色管中依次加0、 1 、 2、3、4、5（ml）的标准磷酸液，定容，静置半小时. 以0号为空白溶液，在分光光度计上比色（光波为420nm）测定光密度。在方格纸上，以光密度为横轴，以浓度为纵轴，做标准曲线。