光学显微镜课件.ppt

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4. 圆形细胞观察(蛙血细胞涂片) 双目生物显微镜 荧光显微镜 倒置显微镜 紫外光显微镜 偏光显微镜 激光扫描共聚焦显微镜 ……… 七、光学显微镜的分类 思考题 在使用高倍镜时,如果把标本片放反了,将会出观什么问题?为什么? 在低倍镜调节焦距时。当视野中出现了能随标本片移动而移动的颗粒或斑纹。是否只要调节推进器将标本对准物镜中央,就一定能观察到标本的物像?为什么? 高倍镜呢? 你如何分析判断视野中所见到的污物点是在目镜上? 使用显微镜观察标本.为什么—定要从低倍镜到高倍镜再到油镜的顺序进行? 在低倍镜下已看到物像。在转换高倍镜时却直接转换不过来,试分析可能有哪些原因? 谢谢! * 我们如果把影像放大数倍,会发现这些连续色调其实是由许多色彩相近的小方点所组成,这些小方点就是构成影像的最小单位“像素”,所谓的“分辨率”指的是单位长度中,所表达或撷取的像素数目;像素和分辨率是成正比的,像素越大,分辨率也越高; 从像素角度来理解,人眼的分辨率非常高,因为人眼有1.2亿个视杆细胞,600万~700万的视锥细胞,所以严格来说,人眼可能是上亿像素的数码相机。那是保证每个杆状细胞和锥状细胞都能接收到像点的情况下,这是一个广义的理解。 实际所说的分辨率,是指两个物体刚好能分辨开的距离。 人眼:人眼观察物体的能力是有限的.一般的情况下,在25cm的明视距离内,人眼只能分辨相距0.1-0.2mm的两个物体.也就是说,当两个物体相距不到0.1mm的时候,人眼就会把它们看成是一个物体了.这个极限便称为人眼的分辨本领.光学显微镜:0.2um 电子显微镜:0.2nm * 光学显微镜有很高的分辨率和放大倍数,是研究物质微观结构的有力工具,显微镜的发明把人类的视野从宏观引入到微观,特别在医学界起了极大地作用,导致了19世纪细胞学、微生物学等学科的建立。 * * * * 荷兰眼镜制造商J.Janssen和Z.Janssen父子制作了第一台复式显微镜,尽管其放大倍数不超过10倍,但具有划时代的意义 * 1665 英国人Robert Hook用自己设计与制造的显微镜(放大倍数为40-140倍)观察了软木(栎树皮)的薄片,第一次描述了植物细胞的构造,并首次用拉丁文cella(小室)这个词来称呼他所看到的类似蜂巢的极小的封闭状小室(实际上只是观察到到纤维质的细胞壁)。 * 1680荷兰人A. van Leeuwenhoek成为皇家学会会员,一生中制作了200多台显微镜和500多个镜头。他是第一个看到活细胞的人,观察过原生动物、人类精子、鲑鱼的红细胞、牙垢中的细菌等等。 * 焦距较短,靠近观察物体,成实像的透镜组称为物镜;焦距较长,靠近眼睛、成虚像的透镜组称为目镜; * * * * 显微镜和放大镜起着同样的作用,就是把近处的微小物体成一放大的像,以供人眼观察。只是显微镜比放大镜可以具有更高的放大率而已。 物体位于物镜前方,离开物镜的距离大于物镜的焦距,但小于两倍物镜焦距。所以,它经物镜以后,必然形成一个倒立的放大的实像AB。 AB靠近F2的位置上。再经目镜放大为虚像AB后供眼睛观察。目镜的作用与放大镜一样。所不同的只是眼睛通过目镜所看到的不是物体本身,而是物体被物镜所成的已经放大了一次的像 * * * * * * 当光源为多色光的情况下,会产生色差,单色光不产生色差! * * * 焦深指保持于焦点区的最大深度,焦深随物镜倍率增加而减小,深(Depth of focus)即物镜成象的焦点深度。一般物镜成象时并不仅仅只成一个平面,而是上下一定范围内都能看清楚。越是高倍的物镜焦深越短。对于显微摄影,如果需要焦深较大的效果,则可以选择同倍率下N.A.较小的物镜或使用带光阑的物镜,减小NA值。 物镜是由若干个透镜组合而成的一个透镜组。组合使用的目的是为了克服单个透镜的成像缺陷,提高物镜的光学质量。显微镜的放大作用主要取决于物镜。物镜质量的好坏直接影响显微镜映像质量,是决定显微镜的分辨率和成像清晰程度的主要部件。 * * * (1) NIKON ---制造商名称: 尼康公司 (2) PLAN APO---物镜的名称: 平场复消色差物镜 (3) 60X 放大倍数: 60倍 (4) 0.95 数值孔径: 0.95 (6) DIC M 功能: 可以做DIC (7) ∞/0.11-0.23 表示无限远筒长/盖玻片厚度 (8) WD 0.15 表示工作距离 * * * 光学显微镜基本结构: 1. 照明灯(Lamp) 2. 聚光器(Condenser) 3. 载物台和切片夹(Mechanical stage and specimen retainer) 4. 推进器(Mechanical stage adjustm

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