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3本研究的背景和意义…………………………………………………………………………．．5
第二章龙眼叶片CHS基因eDNA全长的克隆………………………………………………．．7
l材料与方法……………………………………………………………………………………．．7
1．1材料…………………………………………………………………………………………………………………………．7
I．1．1试验材料……………………………………………………………………………………7
1．1．2仪器与设备…………………………………………………………………………………7
1．1．3试剂………………………………………………………………………………………………………………………7
1．1．4菌株和质粒载体……………………………………………………………………………．7
1．1．5实验用具与耗材………………………………．．：…………………………………………。7
1．1．6引物合成……………………………………………………………………………………7
1．2方法…………………………………………………………………………………………………………………………．8
1．2．1龙眼叶片总RNA提取和检测……………………………………………………………．．8
1．2．2龙眼叶片CHS基因保守区克隆…………………………………………………………一8
1．2．3龙眼叶片C而酪基因3’RACE……………………………………………………………．1l
1．2．4龙眼叶片CHS基因5’RACE……………………………………………………………．13
1．2．5龙眼叶片C无酪eDNA开放阅读框(OI江)扩增………………………………………。15
2结果和分析……………………………………………………………………………………．15
2．1龙眼叶片总RNA的提取与纯度检测……………………………………………………．．15
2．2龙眼叶片CHS基因eDNA保守区扩增结果……………………………………………。16
2．3龙眼叶片CHS基因3'RACE扩增结果……………………………………………………16
2．4龙眼叶片C雕基因5'RACE扩增结果………j…………………………………………．．18
2．5龙眼叶片C^酪基因eDNA全长的获得……………………_…………………………．．20
2．6龙眼叶片CHS基因eDNA可阅读框(ORF)扩增结果………………………………。2l
3生物信息学分析………………………………………………………………………………23
3．1CHS基因eDNA序列及其编码产物的同源性分析………………………………………23
3．2龙眼叶片CHS基因蛋白序列分析………………………………………………………．．24
3．2．1龙眼叶片CHS基因氨基酸及亲水性分析………………………………………………24
3．2．2龙眼叶片CHS基因氨基酸编码产物同源性分析………………………………………．26
3．2．3龙眼叶片CHS蛋白质保守区的预测及分析……………………………………………29
3．2．4龙眼叶片CHS蛋白质跨膜区结构及二级结构的预测…………………………………29
l
4讨论…………………………………………………………………………………………………………………………．．3
第三章龙眼叶片CHI基因eDNA全长的克隆………………………………………………32
1材料与方法……………………………………………………………………………………。32
1．1材料………………………………………………………………………………………………………………………一32
1．1．1试验材料……………………………一……………………………………………………．32
1．1．2仪器与设备………………………………………………………………………………。32
1．1．3试剂……………………………………………………………………………………………………………………．32
1．1．4菌株和质粒载体……………………………………………………………………………32
1．1．5实验用具与耗材……………………………………………………………………………32
1．1．6引物合成…………………………………………………………………………………。32
1．2方法………………………………………………………………………………………………………………………。32
1．2．1
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