水杨酸钠药代动力学实验分析.doc

word 资料下载可编辑 专业技术资料 全血水杨酸钠药物代谢动力学参数的测定 实验目的： 掌握药物代谢动力学参数的意义及其测定方法，掌握用分光光度法测定水杨酸钠（sodium salicylate）的血药浓度。 二、实验动物： 家兔 体重2.585kg 性别：雌 实验药品： 20%乌拉坦、 生理盐水、0.5%水杨酸钠、0.06%水杨酸钠标准液、10%三氯醋酸、10%三氯化铁、蒸馏水 水杨酸钠在酸性环境中成为水杨酸（salicylic acid），与三氯化铁生成一种紫色络合物。该络合物在520nm 波长下比色，其光密度与salicylic acid 浓度成正比。反应式为： 实验器材： 电子天平、兔台、5ml和1ml枪头、5ml注射器、6号针头、手术器械、动脉插管、棉球、头皮针、10ml离心管、722分光光度计、离心机、涡旋混匀器 五、实验方法 取10支10ml试管，用0.5%肝素润湿管壁。 家兔称重，从兔耳缘静脉注射20%乌拉坦（1g/kg体重，注射了13ml），待兔麻醉后，将其仰卧，先后固定四肢及兔头(此时家兔惊醒，补助乌拉坦6ml)。 剪去颈前部兔毛，正中切开皮肤5-6cm，用止血钳纵向分离软组织及颈部肌肉，暴露器官及与气管平行的颈动脉。分离颈动脉，行颈动脉插管。手术完毕后，用温热的生理盐水纱布覆盖手术创口。静脉注射肝素，剂量为1000U/kg体重（约为2.58ml）。 取1支10ml试管，家兔颈动脉取血1.5ml，摇匀试管内血液，防止凝血。 沿对侧耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠150mg/kg（因注射过程中发现部分药品漏出，补注了一部分，估计约为3.9ml）。于注射后1、3、5、10、20、50、80、110min分别颈动脉放血1.5ml入相应的试管并摇匀。 取10支10ml离心管，水杨酸注射前取血管子标为“对照”，水杨酸注射之后不同时间取血管标为相应“取血时间”，另有1个管子没有取血，直接加入配置好的0.06%水杨酸钠标准液标为“标准”，按下表加入样品及试剂： 试管号 10%三氯制酸（ml） 全血（ml） 0.06%水杨酸钠（ml） 蒸馏水（ml） 对照 4 1 0 1 标准 4 1 1 0 各取血时间 4 1 0 1 各试管用涡旋混匀器充分混匀，2000rpm，离心10min。 各试管取上清液3ml加入另一套干净试管中，再加入10%三氯化铁0.3ml，混匀显色。以对照管调零，再722分光光度计上读取520nm的OD值。 求出水杨酸钠在家兔体内的血药浓度（Y）。先求出标准管浓度（Y0）与OD值（X0）的比值（K），K=Y0/X0, Y=XK。 10、绘出药-时曲线，以水杨酸钠浓度的对数值为纵坐标，对应时间横坐标作图，分析 水杨酸钠药动力学模型及药动学参数计算。 注意事项 颈总动脉插管术。 取血前注意用肝素润湿注射器和针头，取血后注意用肝素封管，避免血液凝固。 注意取药时间的精准性。 注意先放掉残留在管中的液体后再放出的血才为该被收集的血液，不要误取了管中残留的血液和肝素等。 离心后不要用力摇晃细管避免沉淀物溶解。 每次加样时剂量一定要准确。 实验记录 采血时间 校零前实测数据 校零后数据 计算所得药物浓度(mg/ml) 对照 0.185 0 0 标准 0.226 0.041 0.060 1 0.26 0.075 0.109 3 0.229 0.044 0.064 5 0.233 0.048 0.070 10 0.228 0.043 0.063 20 0.222 0.037 0.054 50 0.165 -0.020 -0.029 80 0.163 -0.022 -0.032 110 0.154 -0.031 -0.045 八、数据分析： 因为后三组测量数据偏低，甚至低于对照组，导致计算所得的血药浓度变为负数，这明显是不现实的。因此在之后的软件分析中，将后三组血药浓度视为0进行分析（即舍弃后三组数据）。 分析时采用的程序为PKSolver Compartmental Analysis Report（Version 2.0 ），具体分析结果如下： PKSolver Compartmental Analysis Report ==== Version 2.0 ==== User Information Analyst: User Date: 2014-4-15 Time: 15:03:48 User Settings Time Unit: min Concentration Unit: mg/ml Dose: 390 Dose Unit: mg Number of compartment: 2 Fitting Weight