生物化学RNA的生物合成.ppt

/jrsy/ /jrsy/by/ /jrsy/wh/ /jrsy/yf/ /jrsy/zd/ /jrsy/zl/ /jrsy/zz/ /kfal/沈阳性病医院/kydt/ /lylx/ /qt/ /qt/azb/ /qt/fl/ /qt/lb/ /qt/md/ /qt/rtr/ /qt/rxg/ /rdxw /szqpz/ /szqpz/by/ /szqpz/wh/ /szqpz/yf/ /szqpz/zd/ /szqpz/zl/ /szqpz/zz/ /yydt/ /zjfc/ /zljs/ 2. DNA双链解开 1. RNA聚合酶全酶(?2????)与模板结合 RNApol (?2????) - DNA - pppGpN- OH 3? 转录起始复合物: 3. 在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应，形成转录起始复合物 5?-pppG -OH + NTP ? 5?-pppGpN - OH 3? + ppi 转录起始过程 （二）转录延长 1. ?亚基脱落，RNA–pol聚合酶核心酶变构，与模板结合松弛，沿着DNA模板前移； 2. 在核心酶作用下，NTP不断聚合，RNA链不断延长。 (NMP) n + NTP ?? (NMP) n+1 + PPi 转录空泡(transcription bubble)： RNA-pol （核心酶） ···· DNA ···· RNA /wtrl/ /zy/ /yc/ /yl/ /shqh/ /gwy/ 5? 3? DNA 原核生物转录过程中的羽毛状现象 核糖体 RNA RNA聚合酶 依赖Rho (ρ)因子的转录终止 非依赖Rho因子的转录终止 （三）转录终止 指RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来不再前进，转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。 分类 A T P 1. 依赖 Rho因子的转录终止 Rho因子对RNA上的poly C 结合能力强 Rho因子有ATP酶活性和解螺旋酶活性 与RNA转录产物结合，使得Rho因子和RNA聚合酶都可发生构象变化，从而使RNA 聚合酶停顿，解螺旋酶活性使得DNA/RNA杂化双链拆离，利于产物从转录复合物中释放 Rho因子转录终止的作用： 2. 非依赖 Rho因子的转录终止 DNA模板上靠近终止处，有些特殊的碱基序列，转录出RNA后，RNA产物形成特殊的结构来终止转录。 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` RNA 5?TTGCAGCCTGACAAATCAGGCTGATGGCTGGTGACTTTTTAGTCACCAGCCTTTTT... 3? DNA UUUU...… UUUU...… 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` 茎环(stem-loop)/发夹(hairpin)结构 使RNA聚合酶变构，转录停顿； DNA和RNA各自形成自己的局部双链，使杂化链更加不稳定，以致转录复合物趋于解体。 接着的一串寡聚U，则更是促进RNA新链从模板上脱落的促进因素。 5′pppG 5? 3? 3?5? RNA-pol 茎环结构使转录终止的机理 二、真核生物的转录起始 （一）转录起始 真核生物的转录起始上游区段比原核生物多样化，转录起始时，RNA-pol不直接结合模板，其起始过程比原核生物复杂。 转录起始点 TATA盒 CAAT盒 GC盒 增强子 顺式作用元件(cis-acting element) 1. 转录起始前的上游区段 AATAAA 切离加尾 转录终止点 修饰点 外显子 翻译起始点 内含子 OCT-1 OCT-1：ATTTGCAT八聚体 2. 转录因子 能直接、间接辨认和结合转录上游区段DNA的蛋白质，现已发现数百种，统称为反式作用因子(trans-acting factors)。 反式作用因子中，直接或间接结合RNA聚合酶的，则称为转录因子(transcriptional factors, TF)。 参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ 3. 转录起始前复合物 (pre-initiation complex, PIC) 真核生物RNA-pol不与DNA分子直接结合，而需依靠众多的转录因子。 POL-Ⅱ TFⅡF ⅡA ⅡB 由RNA-Pol Ⅱ催化转录的PIC POL-Ⅱ TFⅡF ⅡH ⅡE TBP TAF TFⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA复合物 TATA ⅡA ⅡB