课件：细菌学.ppt

红嘴病主要发生在虹鳟、大西洋鲑、银大麻哈鱼、克氏鲑和大鳞大马哈鱼，为亚急性和急性全身性传染病，在15℃水温时，潜伏期为5-10d。主要特征是皮下出血，使嘴和鳃盖骨发红，因而称之为红嘴病。此外，上下颌和腭部发炎糜烂，腹鳍、肠道和肌肉也往往出血，因此又称之为肠炎红嘴病。细菌同时也侵入其他脏器，引起炎症。对鲑鳟鱼养殖业可造成严重损失。 据徐伯亥（1991）报道，湖北、湖南和河南三省鲢、鳙鱼暴发性传染病的病原菌在3-4月份（水温10-15℃）时为鲁克尔耶氏菌。此菌主要引起淡水鱼细菌性败血症（Bacterial septicemia of fresh-water fishes） 5.2.6、微生物学检查。 涂片镜检。取病鱼血液和肾脏涂片，革兰氏染色，检查有无革兰氏阴性的小杆菌。 分离培养。可选用TSA、FA进行分离培养，对分离菌应进一步做生化鉴定和血清学检查。 血清学检查。取病鱼肾脏涂片，用间接荧光抗体法检查是诊断此病的一种快速方法。凝集反应可用于分离菌的鉴定。 耶尔森菌的分离与鉴定程序 6、假单胞菌属（Pseudomonas Migula 1894） 6.1概述 G-，直或微弯的杆菌，不呈螺旋状，0.5-1.0μm×1.5-5.0μm。多单在。不产芽孢。以单极毛或数根极毛运动，罕见不运动者。有的种还具短波长的侧毛。需氧，进行严格的呼吸型代谢，以氧为最终电子受体。在某些情况下，以硝酸盐为替代的电子受体进行厌氧呼吸。不产生黄色素。几乎所有的种不能在酸性（pH4.5）条件下生长。大多数种不需要有机生长因子。化能营养异养菌，有的种是兼性化能自养，利用H2或CO为能源。氧化酶阳性或阴性，接触酶阳性。在生长过程中产生各种水溶性色素。DNA的G+C为58-70mol%。 在自然界中分布极广，土壤、淡水、海水、污水、动植物体表和粘膜等处均有存在。本属约有140余种，引起鱼类假单胞菌病（Pseudomonas Disease）的有荧光假单胞菌、鳗败血假单胞菌、绿针假单胞菌和恶臭假单胞菌等。 6.2 荧光假单胞菌（P.fluorescens） 广泛存在于水、污水和土壤中，是鱼类赤皮病的病原菌，也是引起水产品腐败的腐生菌。伯吉氏分类系统（1984）把本菌分成I-V个生物型，鱼类病原性荧光假单胞菌多属于生物I型。 6.2.1、形态及染色特性。G-，杆状，两端钝圆，大小为0.7-0.8×2.3-2.8 μm。老龄培养物菌体较短而纤细。单个或成双排列。能运动，有1-3根极端鞭毛，个别菌有时失去鞭毛。无芽孢。菌体染色均匀。 6.2.2、生长要求及培养特性。在普通琼脂培养基上生长良好，形成表面光滑、湿润，边缘整齐，灰白色或浅黄绿色，半透明，微隆起，直径1-1.5 mm的菌落。能够产生水溶性的荧光色素（呈黄绿色），能渗入培养基内，使培养基变为黄绿色。液体培养生长丰盛，均匀浑浊，有少量絮状沉淀，表面有光泽柔软的菌膜，一摇即散。24 h后，培养液表层产生色素。明胶穿刺24 h后杯状液化，72 h后层面形液化，液化部分出现色素。用马铃薯培养，中等生长，微凸、光滑、湿润，菌落呈绿色，培养基2d后呈绿色。兔血琼脂β型溶血。 专性需氧菌，生长的适宜温度为25-30℃。大多数菌株在4℃以下可以生长；41℃不生长。生长pH: 5.0-9.7(5.7-8.4)。 6.2.3、生化特征。本菌能产生氧化酶、脂酶和卵磷脂酶，不产生吲哚和硫化氢。MR和V.P试验阴性，枸椽酸盐利用阳性，液化明胶。多数菌株能分解葡萄糖、木糖、蕈糖、甘油、阿拉伯糖、山梨醇、蔗糖等，产酸不产气；不分解乳糖、甘露醇、麦芽糖。染色体DNA中的G+C含量为59.4-61.3mol%。 6.2.4、抵抗力。本菌在淡水中能存活140d 以上，在半咸水中存活50d左右，但在海水中生存的时间较短。本菌对四环素、链霉素、卡那霉素、粘菌素、口恶喹酸、萘啶酸、磺胺二甲基异口恶唑、呋喃唑酮敏感，但对青霉素、氯霉素、红霉素以及弧菌抑制剂O/129和新生霉素不敏感。 6.2.5、病原性。本菌主要感染草鱼和青鱼，也可感染鱼师、鲷、虹鳟、红点鲑等其他鱼类。细菌经伤口侵入皮肤组织，引起体表皮肤出血发炎、糜烂和溃疡。受害部位多在躯干两侧和腹部，以及鳍和鳃。鳍条间组织腐烂后形成蛀鳍。有时，鱼的肠道亦充血发炎。不同大小鱼均可感染发病。无明显的流行季节。 6.2.6、微生物学检查。 涂片镜检。取病鱼体表病变组织或肾脏、脾脏等脏器涂片，革兰氏染色后镜检，可见许多革兰氏阴性菌。 分离培养。取病料划线接种于普通琼脂平板，小鱼则整尾加PBS匀浆后，再涂布于平板上，25℃培养24～48h，检查有无产生水溶性荧光色素的菌落形成。取可疑菌落进一步做生化鉴定。 血清学检查。常采用直接荧光抗体技术。 6.3 鳗败血假单胞菌（P.anguilliseptica） 鳗鱼和香鱼红