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低氧通过自噬-凋亡通路介导肺癌细胞系对顺铂敏感性降低的研究老年医学专业论文
安徽医科大学博士学位论文
安徽医科大学博士学位论文
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中英文对照词表
英文缩写
英文全称
中文全称
ATG
PKB
Autophagy-related genes
protein kinase B
自噬相关基因 蛋白激酶 B
cDNA complementary DNA 互补脱氧核糖核酸
CytC Cytochrome C 细胞色素 C
DEPC diethypyrocarbonate 焦碳酸二乙酯
DNA deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸
dNTP deoxyribonucleoside triphosphate 脱氧核糖核苷三磷酸
DMSO dimathyI sulfoxide 二甲基亚砜
DTT dithiothreitol 二硫苏糖醇
EB ethidium bromide 溴乙锭
EDTA ethylenediaminetetraacetic acid 已二胺四乙酸
FBS fetal calf serum 胎牛血清
FCM flow cytometery 流式细胞术
FITC fluorescein isothiocyanate 异硫氰酸荧光素
HEPES N-2-hydroxyethylpiperazine-N-2-ethane sulfonic acid
N-2 羟乙基哌嗪 N-2-
乙磺酸
HRP Horseradish peroxidase 辣根过氧化酶
IL-6 Interlukin 6 白细胞介素-6
Kb kilobase 千碱基对
kDa kilodalton 千道尔顿
LC3 microtubule-associated protein 1 light chain 3
微管相关蛋白 1 轻链 3
MDC Monodansylcadaverine 单丹磺酰尸胺
mTOR mammalian target of rapamycin 雷帕霉素的哺乳类靶
蛋白
MTT thiazolyl blue 噻唑蓝
mRNA message RNA 信使核糖核酸 PAGE polyacryamide gel electrophores 聚丙烯酰胺凝胶 PCR polymerase chain reaction 聚合酶链式反应
PVDF polyvinylidene difluoride 聚二氟乙烯
PBS Phosphtate buffer saline 磷酸盐缓冲液
TNF-α Tumor necrosis factor-α 肿瘤坏死因子-α
RNA ribonucleic acid 脱氧核糖核酸
Rpm Rovolution per minute 每分钟转数
SDSsodium dodecyl sulfate十二烷基硫酸钠TADTranscriptional activation
SDS
sodium dodecyl sulfate
十二烷基硫酸钠
TAD
Transcriptional activation domain
转录激活区
TEM
Transmission-electron microscope
透射电子显微镜
TEMED
n,n,n,n-tetramethylethylenediamin
四甲基乙二胺
Tris
Tris-(hydroxymethyl)aminomethane
三(羟甲基)氨基甲烷
反转录 PCR
第一部分 自噬在肺癌发病机制以及化疗中的研究
摘 要
研究背景
肺癌是当今发病和死亡人数最高的恶性肿瘤。肺癌的治疗仍是以铂类为基础 的综合化疗方案,然而目前的化疗效果非常不理想,特别是在进展期的肺癌患者 中。有报道称低氧在化疗耐药中起了很关键的作用。但此方面的研究甚少。自噬 是生命进化过程中一个非常古老的生物学现象,广泛地存在于动植物细胞内,其 旨在清除细胞内受损的细胞器和衰老的蛋白,以维持细胞内环境稳态。自噬是细 胞受到应激压力如低氧、药物刺激时产生的一种自我保护机制。在应激压力下, 有效的自噬可以保护细胞免受凋亡,以供细胞在应激压力下得以继续生存。而自 噬缺陷在某些疾病如肿瘤发生、神经退行性病变中扮演着非常关键的作用。目前, 细胞自噬已经成为肿瘤领域的新的研究热点。自噬是否参与了低氧介导的肺癌细 胞对顺铂化疗敏感性下降的过程以及其中机制,目前尚不清楚。
研究目的
1. 检测肺癌组织中的自噬水平;
2. 探讨顺铂以及低氧条件下肺癌细胞发生自噬的过程;
3. 研究在低氧条件下,自噬在肺癌细胞系对顺铂的化疗敏感性改变中的作用及 其可能的机制。
研究方法
1. 自噬相关基因 Beclin-1 和 LC3-II 在肺癌组织中的表达
40 例肺癌患者的术后肺癌标本,并以距癌中心 5cm 的组织作为癌旁对照, 采用实时定量 PCR
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