肝细胞癌中外周血浆SLIT2基因和DAPK基因甲基化检测及临床意义-外科学(普外)专业论文.docx

- - PAGE 10 - 英文缩略词对照表 Abbreviation 英文缩写 英文全称 中文全称 AFP CIMP Alpha-fetoprotein CpG island methylator phenotype 甲胎蛋白 甲基化表型 DAPK death-associated protein kinase 致死相关蛋白激酶 DNMT DNA methyltransferases 甲基转移酶 EB ethidium bromide 溴化乙锭 HBV Hepatitis B virus 乙型肝炎病毒 HCC Hepatocellular carcinoma 肝细胞癌 MSP Methylation-speciafic PCR 甲基化特异性 PCR PHC Primary hepatic carcinoma 原发性肝癌 SAM SLIT2 S-adenosylmethionine Slit homolog 2 S-腺苷蛋氨酸 神经生长导向因子 2 5-aza-CdR Decitabine 5-氮杂脱氧胞苷 5-mC 5-MethylCytosine 5-甲基胞嘧啶 肝细胞癌中外周血浆 SLIT2 基因和 DAPK 基因 甲基化检测及临床意义 硕士研究生 王 平 硕士生导师 耿小平 摘 要 目的 评估外周血浆 DNA 甲基化在肝细胞癌早期诊断中的作用，筛选血浆灵敏度、 特异性高的甲基化抑癌基因。方法 采用甲基化特异性 PCR(MSP)检测 34 例经病理 证实肝细胞癌患者血浆及其配对癌组织中的 SLIT2、DAPK 基因启动子甲基化状 态，并分析其与临床资料的关系。 结果 34 例 HCC 患者癌组织中 SLIT2 基因和 DAPK 基因甲基化率分别为 70.5%（24 例/34 例）和 79.4%(27 例/34 例)，相应外周 血浆中甲基化率分别为 44.1%(15 例/34 例)和 50%(17 例/34 例)。10 例健康对照血 浆均未检出甲基化改变。血浆 SLIT2 基因和 DAPK 基因甲基化检测的灵敏度分别 为 62.5%和 63%，特异度均为 100%，阴性预测值分别为 52.6%和 41.2%，阳性预 测值均为 100%。肿瘤组织和外周血浆中 DNA 甲基化率与各临床资料间无明显相 关性。全部患者中血浆 SLIT2 基因和 DAPK 基因甲基化联合检出率为 61.8%（21 例/34 例）。以 AFP≥400 ug/L 视为阳性，本组病例 AFP 阳性率为 47.1%（16 例/34 例）。AFP 阴性组中血浆 SLIT2 基因和 DAPK 基因的甲基化率分别为 38.9%(7 例/18 例)和 50%（9 例/18 例），血浆 SLIT2 基因和 DAPK 基因甲基化联合检测，其甲基 化率为 61.1%（11 例/18 例）；若以 AFP≥20ug/L 视为阳性，本组病例 AFP 阳性率 为 67.4%（23 例/34 例）。AFP 阴性组中血浆 SLIT2 基因和 DAPK 基因的甲基化率 分别为 36.4%(4 例/11 例)和 45.5%（5 例/11 例），血浆 SLIT2 基因和 DAPK 基因甲 基化联合检测，其甲基化率为 63.6%（7 例/11 例）。结论 HCC 患者外周血浆中可 检测到 SLIT2 基因和 DAPK 基因甲基化改变，且血浆和组织中两基因甲基化改变 具有良好一致性。作为一种微创手段，联合血浆 DNA 甲基化和 AFP 检测可提高 HCC 的诊断敏感性。 关键词 癌，肝细胞 DNA 甲基 DAPK 基因 SLIT2 基因 血浆 Determination and Clinical Significance of SLIT2 Gene and DAPK Gene Methylation of Peripheral Plasma in Hepatocellular Carcinoma Postgraduate Ping Wang Tutor Xiao-Ping Geng Abstract Objective To evaluate the effect of methylation determination about the peripheral plasma DNA in the diagnose of Hepatocellular Carcinoma and select the highly sensitive and specific methylated cancer suppressor genes. Methods Methylation-specific PCR(MSP) was used to detect the degree of