《青钱柳总黄酮含量测定和提取工艺优化》-毕业论文（设计）.docVIP

青钱柳总黄酮含量测定和提取工艺优化 摘要：目的 用三氯化铝显色法测定青钱柳总黄酮含量并对溶剂回流提取法提取总黄酮进行工艺优化。方法 通过对芦丁与槲皮素对照比较选择以芦丁为标准品，三氯化铝显色后采用紫外-可见分光光度法在410nm波长处测定青钱柳总黄酮的含量；以总黄酮含量为指标通过正交试验对提取条件进行了优化。结果 芦丁标准品的线性回归方程为A=0.0269C+0.0054，R2=0.9996，加标平均回收率为100.29%，RSD 值为1.48% ( n = 3)。通过正交试验得出回流提取的最佳工艺条件为乙醇浓度60%、料液比1∶20 (g/ mL) 、提取时间2h、提取温度为90℃。在最佳条件下提取总黄酮得率为22.04mg/g。结论 采用三氯化铝显色法测定青钱柳总黄酮含量简便、准确，适合青钱柳总黄酮含量的测定；通过正交试验得到青钱柳总黄酮的最佳提取工艺。 关键词: 青钱柳 总黄酮 三氯化铝显色法 提取工艺 正交试验 文章编号 青钱柳Cyclocarya paliurus(Bata1.)Iljinsk为胡桃科Juglandaceae青钱柳属植物，该属植物现仅有1种，为我国特产[1]。用其叶子泡出的茶甘甜滋润，生津止渴，被认为具有清热解暑、防病治病和延年益寿等功效，故又被当地老百姓称为“甜茶”、“神茶”[2]。Hiroshi Kurihara等人研究表明：青钱柳提取物能通过抑制胰脂肪酶活性有效控制脂肪的吸收，从而证明青钱柳能降低血脂水平，促进脂肪代谢，能有效防治一些疾病：如动脉硬化、脑中风、心肌梗塞等[3]，他还证明青钱柳能抑制葡萄糖的吸收，降低人体血糖，从而可以预防由高血糖引起的一系列病症[4]。 黄酮类成分在人类饮食结构中占有重要的地位，具有保肝、扩冠、抗炎、降低血管脆性，解除痉挛，增强心脏收缩，有一定程度的抗菌及抑制肿瘤细胞等作用。同茶叶相比青钱柳黄酮类化合物含量相对较高，可作为这些物质的补充源[5]。因此，对青钱柳黄酮类成分的研究有着十分重要的意义。谢明勇等人曾经对青钱柳黄酮类化合物结构及含量做过研究[8]，用三氯化铝显色法测定过青钱柳黄酮甙的含量[5]，朱贲峰等人曾用硝酸铝-氢氧化钠显色法测定青钱柳总黄酮含量[9]，但对于这两种测定方法都没有作具体考察研究，同时目前对于青钱柳总黄酮的提取工艺的研究也还未见报道。因此本文先建立了青钱柳总黄酮含量的测定方法并对该方法作了方法学考察，然后通过正交试验，以总黄酮含量为指标对溶剂回流提取青钱柳总黄酮的工艺条件进行了优化。 1 材料试剂与设备 _______________________________ 收稿日期： 基金项目：教育部长江学者和创新团队发展计划资助项目（IRT0540），江西省自然科学基金资助项目（9920029）和南昌大学测试基金资助项目（No.2006017） 作者简介：董彩军，女，1981年出生，硕士研究生 *通讯作者：谢明勇，男，1957年出生，博士，教授，博士生导师，主要从事食品化学与营养学研究。E-mail： HYPERLINK mailto:myxie@ncu.edu.cn myxie@ncu.edu.cn。 1.1原料 青钱柳：由江西神茶实业有限公司提供； 1.2试剂 芦丁标准品：中国药品生物制品检定所；槲皮素标准品：中国药品生物制品检定所；无水乙醇，无水甲醇等试剂均为分析纯；聚酰胺80-100目（浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂）；超纯水。 1.3仪器 TU-1900双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限公司) ；UV-2000型紫外可见分光光度计（尤尼科上海仪器有限公司）；旋转蒸发仪（上海申生科技有限公司）；SHZ—Ⅲ型循环真空泵（上海亚荣生化仪器厂）；HH-4数显恒温水浴锅（国华电器有限公司）； FA1104电子天平（上海精天电子仪器厂）；DGG-9140B型电热恒温鼓风干燥箱（上海森信实验仪器有限公司）；TDL-5型离心沉淀机（上海飞鸽系列离心机厂）；Millipore超纯水系统（美国Millipore公司）。 2 试验方法 2.1青钱柳总黄酮的分析测定方法[6] 2.1.1 标准品溶液的制备　 芦丁标准溶液：精密称取在120℃干燥至恒重的芦丁对照品11.2mg于100 mL容量瓶中，用70 %乙醇溶解稀释定容至刻度，摇匀，作为对照品溶液(每1mL含芦丁0.112mg) 。 槲皮素标准溶液：精密称取在120℃干燥至恒重的槲皮素对照品3mg于25mL容量瓶中，用70%乙醇溶解稀释定容至刻度，摇匀，作为对照品溶液(每1mL含槲皮素0.12mg) 。 2.1.2 标准品的选择 移取样品、芦丁和槲皮素各1mL于10mL具塞试管中，加入1mL1%的三氯化铝/甲醇溶液，用甲醇定容，摇匀，放置15 min。同法制备空白液。在200～50