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考试说明对“实验与探究”能力的要求 微生物培养的基本程序 果酒果醋的制作 泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定 根据样品颜色反应,与标准液对比,估计亚硝酸盐含量。 用分光光度计定量测定标准液,建立标准曲线。通过比色,计算样品中亚硝酸盐含量。 光密度 浓度 从市场上随机买了散装泡菜,对其中的亚硝酸盐含量进行了测定,显色结果表明其中的亚硝酸盐含量很低,比我们自制泡菜第五天测定的亚硝酸盐含量还低。 结果及分析: 发酵温度:13~15℃ 单位:mg/kg 含量 1.实验原理: ⑴结构本身有颜色、易观察,不需染色 (如观察叶绿体、细胞质流动、质壁分离及复原) ⑵结构本身无颜色、不易观察,需染色 ①观察细胞的活性或生理变化—活体染色 (如观察线粒体—健那绿B;观察液泡—中性红) ②观察静态结构或细胞内特定物质的分布—染色 (如DNA、RNA的分布、脂肪的鉴定、有丝分裂) 二、光学显微镜操作技术 2.方法步骤:取材→制片→观察 预处理 时间 部位 方法 撕、切、涂、 挑、剪 观察 漂洗 盖片 取材 展平 滴液 染色 例:若要在普通显微镜下观察到质壁分离、RNA和脂肪,下列四组材料中应选择的一组是 A.水稻胚乳和花生子叶 B.天竺葵叶和水稻胚乳 C.紫色洋葱和花生子叶 D.天竺葵叶和紫色洋葱 用紫色洋葱鳞片叶外表皮观察质壁分离 用紫色洋葱鳞片叶内表皮观察DNA和RNA在细胞中的分布 RNA的分布 DNA的分布 花生子叶的徒手切片(苏丹Ⅲ染色) 子叶细胞 脂肪颗粒 例:下图为显微镜下某植物细胞在30%蔗糖溶液中的示意图。下列叙述中错误的是 A.若将细胞置于清水中,A基本保持不变 B.若该细胞处于40%蔗糖溶液中,B/A值将变小 C.B/A值能表示细胞失水的程度 D.A、B分别表示细胞和液泡的长度 细胞壁 细胞膜 液泡膜 选用紫色洋葱鳞片叶外表皮观察质壁分离的原因是什么?用洋葱鳞片叶内表皮能否观察到质壁分离现象? 洋葱鳞片叶内表皮的质壁分离 细胞壁 细胞膜 液泡膜 复原后不能观察到黑藻细胞细胞质的流动现象,细胞还活着吗? 如何用该实验测定细胞液的浓度范围? * ◆能独立完成“生物知识内容表”的生物实验。包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤,掌握相关的操作技能,并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用。 ◆具备验证简单生物学事实的能力,并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理。 ◆具有对一些生物学问题进行初步探究的能力,包括运用观察、试验与调查,假说演绎、建立模型与系统分析等科学研究方法。 ◆能对一些简单的实验方案作出恰当的评价和修订。 生物技术与实践专题 基础实验 光学显微镜操作技术 物质的分离与鉴定技术 微生物的培养与利用 调查 科学思想和一般研究方法 从技术和研究方法的角度分类 北京市考试说明P218 生物学重大发现的启迪 做出假设和预期 设计可行的实验方案和实验装置 收集、分析数据,做出合理的判断 对简单的实验方案做出恰当的评价和修订 北京高考考试说明中的要求 发酵过程中亚硝酸盐含量的测定 利用微生物进行发酵来生产特定的产物 (果酒、果醋、腐乳、泡菜) 培养基对微生物的选择作用 某种微生物数量的测定 微生物的培养与分离 微生 物的 培养 利用 具体内容 类型 技术 方法 利用 培养基的配制—称量→溶化→调pH→分装→包扎 灭菌(高压蒸汽灭菌) 接种 固体培养基—平板划线(接种环)、稀释涂布(玻璃刮刀) 液体培养基—用接种环蘸取菌液(扩大培养) 培养 固体培养基—倒置,37℃恒温培养箱,24h左右 液体培养基—空气浴或水浴培养箱(摇床),震荡培养 固体培养基—划线的末端出现单菌落 液体培养基—培养液变浑浊 观察 废弃菌种和培养基灭菌后丢弃 空白培养基 生长细菌的培养基 分离微生物纯种的方法 1.平板划线法 请分析没有出现单菌落的可能原因 菌液浓度大 划线次数少 培养时间长 2.稀释涂布法 3.利用选择培养基进行分离 如利用只含尿素为氮源的选择培养基分离尿素分解菌 尿素和酚红的作用? 4.利用鉴别培养基进行鉴别后分离 抗生素 X-gal 卵磷脂 选择 鉴别 酚红作为酸碱指示剂被添加到了培养基中,其变色范围是pH6.4~8.2,在酸性情况下呈黄色,碱性情况下呈红色 以尿素为氮源的微生物培养一段时间后,由于细菌产生的脲酶向周围扩散,将培养基中的尿素分解,产生的NH3使培养基的pH由原来的中性变为碱性,于是培养基中的酚红由黄色变成红色,圆形红色区域愈大,表明这种菌利用尿素的能力愈强。 加盐酸的酚红 加氢氧化钠的酚红 酚红 尿素培养基 未接种的尿素培养基 10-5 10-4 7月20日 8月15日 分离土壤中的纤维素分解菌 1.稀释涂布法 微生物的计数 2.显微观察
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