烟粉虱内共生菌传毒相关groEL基因dsRNA载体的构建及其在烟草中.PDF

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烟粉虱内共生菌传毒相关groEL基因dsRNA载体的构建及其在烟草中

第36 卷第6 期 湖南农业大学学报( 自然科学版) Vol .36 No. 6 20 10 年 12 月 Journal of Hunan Agricultural University (Natural Sciences) Dec .20 10 DOI:10.3724/SP.J.1238.2010.00620 烟粉虱内共生菌传毒相关 groEL 基因 dsRNA 载体的构建及其在烟草中的表达 1,2 2 2 1 3 1* 唐前君 ,张德咏,刘勇,李基光,谢丙炎,肖启明 ( 1.湖南农业大学 生物安全科学技术学院, 湖南 长沙 410128 ;2.湖南省农业科学院 植物保护研究所,湖南 长 沙 410125 ;3. 中国农业科学院 蔬菜花卉研究所,北京 100081) 摘 要:烟粉虱内共生菌groEL 基因编码一种与植物病毒传毒相关的GroEL 蛋白 .以B 型烟粉虱为研究对象, 利用1 对特异引物,对B 型烟粉虱体内的groEL 基因进行PCR 扩增,选取502 bp groEL 基因片段构建dsRNA , 并将其连接植物表达载体pBIN19 ,将重组质粒电激转化农杆菌菌株LBA4404. 采用农杆菌浸染转化本氏烟草, PCR 筛选表明,目的片段已整合至转基因植株的基因组DNA ;RT-PCR 结果表明,502 bp 的groEL 基因片段在 转基因植株中被转录 . 关 键 词 :烟粉虱;groEL 基因;内共生菌;病毒结合蛋白;双生病毒;植物表达载体 中图分类号:Q786 文献标志码:A 文章编号:1007-1032(2010)06-0620-06 Construction of dsRNA vector for a viral binding protein gene(groEL) from endosymbionts in Bemisia tabaci and its expression analysis in transgenic Nicotiana benthamianaa 1,2 2 2 1 3 1* TANG Qian-jun , ZHANG De-yong , LIU Yong , LI Ji-guang , XIE Bing-yan , XIAO Qi-ming ( 1.College of Bio-Safety Science and Technology, HNAU, Changsha 410128, China; 2.Institute of Plant Protection, Hunan Academy of Agriculture Science, Changsha 410125, China; 3.Institute of Vegetables and Flowers, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China) Abstract :GroEL, a viral binding protein encoding by groEL gene from endosymbionts in Bemisia tabaci,

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