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开题报告 蜂王浆中氟喹诺酮类抗生素脱除工艺的研究 姓名:汤晓娟 专业：生物工程 指导教师：何荣军 时间:2008.12.10 一.课题研究背景和意义 1.1 课题研究背景： 蜂王浆有增强免疫力、防癌抗癌、抗衰防老、健脑益智、促进生长发育、抗菌消炎、抗辐射、促进组织再生、增强造血功能、调节血压、防止动脉硬化、保护肝脏、催眠、强化性功能以及美容润肤等多方面作用。 其中，尤其值得一提的是在抗衰防老、延年益寿方面的良好作用。 1.2 课题研究的意义： 吸收好 组织浓度高 氟喹诺酮类 抗生素的特点 抗菌谱广 与其他抗菌药物无交叉 耐药性 蜂王浆里含有氟喹诺酮类抗生素，氟喹诺酮类残留除了其副作用直接危害人类外, 更严重的问题是食品中残留低浓度的药物可能使人的致病菌产生耐药性, 从而使氟喹诺酮类药物对人类疾病的疗效降低甚至失效,同时使新开发的氟喹诺酮类药品的市场周期大大缩短。 据相关报道所知，我国某些蜂王浆产品抗生素含量有超标现象,从而导致产品频遭退货，严重影响了蜂王浆的出口。因此, 脱除氟喹诺酮类抗生素是非常重要的！ 二.研究内容 分别采用溶剂法和离子交换法脱除蜂王浆中氟喹诺酮类抗生素（主要指诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星）； 评价两种方法对蜂王浆有效成分含量的影响； 研究脱除部分中有效成分的回收利用。 3.2 研究方法和手段： 抗生素的脱除的方法：溶剂法、离子交换法 抗生素测定方法：液相色谱法 有效成分含量的测定：脂肪和癸烯酸 脂肪的测定方法：凯氏定氮法（测绝对值） 考马斯亮蓝法（测相对值） 癸烯酸的测定方法：液相色谱法 3.3.2 抗生素的脱除 溶剂法（乙酸乙酯） 加萃取剂 离子交换法 用阴阳离子交换双柱脱除氟喹诺酮类抗生素 洗脱 3.4氟喹诺酮类抗生素含量的测定 液相色谱法测定氟喹诺酮类抗生素的含量 取样（调PH到2） 净化 (阳离子交换柱净化 , HLB固相萃取柱净化 ) 进样 空白实验 3.5 蛋白质的相对值的检测 考马斯亮兰法检测蛋白质的相对值 1.作标准曲线 取试管6支，编号1~~6，按表顺序加入各试剂， 并于595nm处测定A值。 2.冰箱取出考马斯亮兰溶液，平衡至室温并混匀； 预热分光光度计20分钟 3.6 癸烯酸含量测定 液相色谱法测10-羟基-α-癸烯酸的含量 样品配制 试样解冻至室温，用玻璃棒充分搅匀，称取0.5g样品，准确至0.0002g，加2mol/L盐酸溶液，搅匀，加7ml乙醇搅匀，移入50ml容量瓶中，加25ml乙醇，加10.0ml内标溶液（羟基苯甲酸甲酯溶液）用乙醇定容，立即在超声波浴上混合15min或在漩涡混匀器上混合15min，取出，在3000r/min离心10min或放置冰箱中过夜等测定。 条件 a）检测波长：2
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